【摘 要】
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热休克蛋白27 (Heat shock protein,Hsp27)是一种广泛存在的不依赖ATP的伴侣蛋白,还可以作为调控因子,参与细胞的多种生物学反应。研究发现,Hsp27在伪狂犬病毒(PRV),猪流行性腹泻病毒(PEDV),猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)等感染过程中扮演重要的角色,但其具体作用机制仍不清楚。为研究Hsp27过表达对病毒增殖的影响,本研究利用RT-PCR方法从Marc-
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热休克蛋白27 (Heat shock protein,Hsp27)是一种广泛存在的不依赖ATP的伴侣蛋白,还可以作为调控因子,参与细胞的多种生物学反应。研究发现,Hsp27在伪狂犬病毒(PRV),猪流行性腹泻病毒(PEDV),猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)等感染过程中扮演重要的角色,但其具体作用机制仍不清楚。为研究Hsp27过表达对病毒增殖的影响,本研究利用RT-PCR方法从Marc-145细胞扩增HSP27基因,并利用PiggyBac真核转座子系统将HSP27基因转染入Marc-145细胞中,通过嘌呤霉素和绿色荧光进行双重筛选获得阳性转化细胞,再经克隆纯化得到单个阳性细胞克隆株。通过观察细胞荧光和Westem Blot鉴定,最终获得过表达Hsp27的Marc-145细胞系。初步研究了该细胞系对病毒增殖的影响,结果显示,Hsp27过表达能过促进伪狂犬病毒(PRV)的增殖,本研究为Hsp27在病毒感染过程中功能与作用机制研究以及病毒与宿主细胞蛋白互作研究提供了可靠的实验材料。
其他文献
本研究围绕着VLPs如何诱导DC成熟以及抗原递呈为核心科学问题,以病毒样颗粒特性以及免疫应答性质为研究目标,通过昆虫杆状病毒表达系统构建不同组装类型的NDV VLPs,以此为免疫原刺激DC并检测成熟相关分子.结果 表明,以M蛋白为骨架配合HN蛋白可组装形成NDV VLPs,经Westem Blot可检测到相关目的 蛋白,在电镜下可观察直径约100nm的病毒粒子,具有囊膜突起以及完整空心结构.VLP
西尼罗病毒(WNV)为典型的蚊媒传播的黄病毒，可引起人类致死性的脑炎和脑膜炎，但目前其病毒-宿主的致病机理还不是十分清楚。目前来看，蛋白组学是研究病毒-宿主相互作用的一个重要的研究手段。利用质谱的手段检测WNV感染宿主细胞的模型，得到了1657个显著发生磷酸化修饰的蛋白。我们利用这些数据进行了生物信息学的富集和分析，并着重对富集在炎症通路上的蛋白进行了研究。通过利用siRNA的手段对其中检测出的三
禽白血病病毒是一种禽肿瘤性反转录病毒，根据致瘤速度的快慢可分为急性致瘤性ALV和慢性致瘤性ALV.2010年，本实验室在"817"肉杂鸡中发现了ALV-J诱发的急性纤维肉瘤，本研究对其进行了病毒分离和基因组鉴定.除了复制完整型ALV SDAU1005外，还扩增到了复制缺陷型的Fu-J株及多个变异株Fu-J1-5.Fu-J携带完整的v-fps肿瘤基因，编码140kD的g-g-fqs融合蛋白；Fu-J
2015年6月份以来我国部分地区暴发鸡心包积液综合征,临床病例均表现严重的心包积液和肝炎病变.主要见于肉杂鸡、麻鸡、三黄鸡,在白羽肉鸡、蛋鸡中也有发生.为明确该病病原及其致病性,对25例临床病例进行了病理学观察和病原学检查.结果 发现所有病例均表现肝细胞灶状坏死,核内有嗜碱性或嗜酸性包涵体；心肌纤维变性,间质水肿、巨噬细胞浸润.电镜观察到肝细胞核内有直径70纳米左右的病毒粒子,呈晶格状排列.用PC
鸡白痢沙门氏菌主要侵害2-3周龄以内的幼雏,引起白色下痢,病死率极高,成年鸡感染后虽然不会出现典型临床症状,但长期处于带菌状态,可以水平传播和垂直传播病菌,对养禽业造成极大的危害,同时也危害公共卫生安全.目前在西方发达国家该病已经被消灭,而我国鸡白痢的爆发仍然多见.目前除了疫病净化仍然没有有效的控制措施,而且鸡白痢沙门氏菌的致病机理仍不清楚.本研究利用免疫沉淀技术和质谱分析筛选到鸡白痢沙门氏菌优势
禽致病性大肠杆菌(APEC)通过特异的呼吸系统感染方式引起禽类患大肠杆菌病,APEC可以迅速地调整毒力相关因子的表达模式以促进对宿主的感染定殖,这些受调节的毒力因子包含自分泌黏附素和K1荚膜,这两种毒力因子促进APEC黏附定殖于宿主的巨噬/非巨噬细胞,及利于APEC耐受血清杀菌作用,当然,在这个感染过程中需要特定的转录调节因子参与APEC毒力因子表达水调控。本研究发现并命名了两个新的转录调节因子A
鸡白痢是由鸡白痢沙门菌引起的一种急性、系统性疾病，能引起雏鸡高发病率和高死亡率，是我国禽养殖业中危害严重的常见性传染病.鸡白痢沙门菌的控制依赖于一个地区的感染程度，感染水平高或者无法进行淘汰扑杀的地区可以考虑使用包括免疫预防在内的综合防制措施，以有效控制或净化鸡白痢.菌影是在革兰氏阴性菌中诱导表达噬菌体PhiX174的E基因，裂解形成的无活性的细菌空壳，可刺激机体产生良好的免疫应答.E蛋白介导的细
本研究主要是分析报告肉鸡产业链中不同环节的沙门氏菌的流行以及沙门氏菌耐药流行特征.针对同一生产链的四个不同来源(种鸡场，肉鸡场，屠宰厂和肉鸡市场)的1148份肉鸡样品进行沙门氏菌鉴定.获得了来源于9个不同生产环节的172株沙门氏菌试验菌株.与此同时，利用药敏纸片法和脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术开展了对172株沙门氏菌菌株的耐药流行特征调查.结果 显示：沙门氏菌肠炎血清型(116/172)在肉鸡产
沙门氏菌是重要的人畜共患病原菌,目前头孢菌素类药物是治疗沙门氏菌侵袭性感染的主要抗菌药物之一.研究食品动物源沙门氏菌对这类耐药性及其传播机制具有重要意义.本实验研究了2014-2015年分离的285株食品动物源沙门氏菌对头孢菌素类药物的耐药性和耐药机制.耐药检测结果发现沙门氏菌对广谱头孢菌素类药物头孢噻呋、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率为30％-52％；基因检测结果显示54株菌携带blaCTX-M基因
衣原体和H9N2亚型禽流感病毒对养禽业造成巨大的威胁,并对人类具有潜在的感染.在临床发病的鸡上都分离到了H9N2和衣原体.然而,这两种病原的混合感染的发病机理并未知晓,导致有效的控制策略的延迟.实验1,给SPF鸡分别气管接种高毒力衣原体HJ株和低毒力的CB3株.与此同时所有的鸡都免疫新城疫疫苗.接种后的7天和10天监测体重、免疫器官指数和T细胞亚型.衣原体高毒力感染组的新城疫抗体水平显著下降.实验