【摘 要】
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本研究围绕着VLPs如何诱导DC成熟以及抗原递呈为核心科学问题,以病毒样颗粒特性以及免疫应答性质为研究目标,通过昆虫杆状病毒表达系统构建不同组装类型的NDV VLPs,以此为免疫原刺激DC并检测成熟相关分子.结果 表明,以M蛋白为骨架配合HN蛋白可组装形成NDV VLPs,经Westem Blot可检测到相关目的 蛋白,在电镜下可观察直径约100nm的病毒粒子,具有囊膜突起以及完整空心结构.VLP
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本研究围绕着VLPs如何诱导DC成熟以及抗原递呈为核心科学问题,以病毒样颗粒特性以及免疫应答性质为研究目标,通过昆虫杆状病毒表达系统构建不同组装类型的NDV VLPs,以此为免疫原刺激DC并检测成熟相关分子.结果 表明,以M蛋白为骨架配合HN蛋白可组装形成NDV VLPs,经Westem Blot可检测到相关目的 蛋白,在电镜下可观察直径约100nm的病毒粒子,具有囊膜突起以及完整空心结构.VLPs能有效刺激小鼠产生特异性抗体,显著高于空白组和灭活组,抗体亚型分析显示以IgG1亚型为主；流式结果显示VLPs组CD3+CD4+T细胞数和CD4/CD8比值显著高于空白组.采用体外细胞因子诱导法成功获得高纯度的未成熟DC,形态呈毛刺状并聚集成簇；将NDV VLPs刺激imDC后观察到细胞突起变多,以CCK-8法、流式细胞术、ELISA法分别检测细胞活性、表面成熟标志分子、相关细胞因子,结果均显著高于空白组.最后通过流式检测分析小鼠脾内成熟DC数量也显著高于空白组.综上所述,NDV VLPs具有完整病毒粒子结构和免疫原性,并可诱导小鼠DC成熟.
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流感病毒的频繁重组不仅能影响病毒的毒力和传播特性,也是产生新型流感病毒的重要途径。目前,H9N2和H5N1禽流感病毒在我国呈现出地方流行性。为了评价H9N2和H5N1病毒潜在重组的能力,以及评价其重组毒株的潜在威胁,我们基于H9N2和H5N1毒株构建了一系列的重组毒株。本研究以一株对小鼠低致病性的H5N1毒株为骨架,逐个将当前流行于我国的优势基因型(S基因型)的内部基因替换上去,拯救了一系列病毒,
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