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目的:IL-33是Th2型免疫反应的关键启动因子,在过敏性疾病中能促进Th2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-9和IL-13分泌.前期从IL-33角度研究药物对过敏性炎症的作用机制时,发现当过敏原对小鼠致敏后产生明显的炎症反应,往往IL-33水平已开始降低,难以用于评价药物影响.因此建立致敏初期IL-33产生的模型,可为探索药物对过敏性疾病初期的作用及其机制提供合适的方法.
方法:①小鼠Th2型过敏性皮炎模型的建立.将BALB/c小鼠于第0天腹部剔毛,在d1、d2天对模型组用FITC涂于腹部(致敏),在d6天用FITC涂于小鼠右耳(攻击),对照组涂等体积溶剂.攻击24h后,检测小鼠的耳肿胀度、ELISA测耳组织匀浆中IL-4、5、9、13的表达水平以及病理组织学检查.②小鼠Th2型过敏性皮炎致敏期IL-33产生模型的建立.在d1、d2天对模型组每只耳朵涂FITC,每天1次,连续致敏两天.对照组涂等体积的溶剂.致敏后24 h检测耳重差、病理组织学检查及耳组织中IL-33水平.
结果:(1)致敏初期及抗原攻击后耳部炎症检测结果:①耳肿胀度比较，在致敏初期，小鼠耳厚与对照组比较，模型组耳厚未见明显增加:小鼠耳重与对照组比较，模型组耳重未见明显增加:病理组织学检查未有明显变化。作为对比，在FITC攻击后耳厚明显增加，耳重也明显增加，且观察到耳组织有大量炎细胞浸润及水肿。②耳组织炎性因子IL-4、5、9、13表达检测，与对照组相比，IL-4、5、9、13水平显著升高;提示FITC可诱导Th2型过敏性炎症，但在致敏初期未出现明显炎症反应。(2)致敏初期及抗原攻击后耳组织匀浆中IL-33的表达。在致敏初期，与对照组比较，模型组耳组织中IL-33水平明显增加，结果证实在致敏期组织中分泌大量的IL-33。而在攻击后24h，组织中IL-33表达逐渐降低，差异没有统计学意义。证实在过敏性疾病致敏初期，炎症反应尚未出现时，IL-33的表达水平较高。
结论:本课题组前期证实FITC可诱导过敏性皮炎，且FITC主要诱导Ⅱ型细胞因子(IL-4、5、9、13)的表达。为探索药物作用机制及筛选可在过敏性疾病启动阶段干预的药物，需要一种建立在Th2型过敏性炎症基础上的致敏初期模型。研究表明IL-33是过敏性疾病早期关键的启动因子，能促进Th2细胞的分化，因此IL-33能成为探索药物对过敏性炎症启动阶段作用非常合适的检测指标。经过研究证实用FITC致敏局部耳组织两天，发现在致敏部位尚未出现炎症表现时，而在攻击之后IL-33的表达水平出现显著升高。提示用该方法成功建立了基于Th2型过敏性炎症的致敏初期IL-33产生的小鼠模型，为研究药物对过敏性疾病启动阶段的作用及机制研究提供了合适的方法。