【摘 要】
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[目的]昆虫在应对不利的环境条件(包括高温)时,通过热激蛋白的上调或下调表达保护虫体不受伤害,这在昆虫抗逆性中起到关键的作用.为了进一步研究瓜实蝇对极端环境温度的
【机 构】
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广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁530007广西农业科学院植物保护研究所/广西作物病虫害生物学重点实验室,广西南宁530007;广西大学农学院,广西南宁53000
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[目的]昆虫在应对不利的环境条件(包括高温)时,通过热激蛋白的上调或下调表达保护虫体不受伤害,这在昆虫抗逆性中起到关键的作用.为了进一步研究瓜实蝇对极端环境温度的适应性机理奠定基础.[方法]根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp90氨基酸保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp90基因部分片段的简并引物,并利用RACE-PCR技术扩增获其全长cDNA序列；采用实时定量PCR技术分析高温处理后瓜实蝇hsp90基因的表达.[结果]扩增获得了瓜实蝇hsp90全长cDNA序列(GenBank获取号：KP864677),该基因全长2 316bp,含1 893 bp的开放阅读框,编码631个氨基酸蛋白,具有4个hsp90基因家族基序标签,预测分子量为72.3 kD,理论等电点5.02.同时在C-末端具有MEEVD基序,推测其属于胞质型热激蛋白.BLAST分析表明瓜实蝇hsp90基因序列与双翅目实蝇科昆虫hsp90基因高度相似,最高相似度达92％.氨基酸序列系统发育分析也显示瓜实蝇hsp90基因高度保守；40℃高温下分别处理雌、雄成虫1、3和5h后,实时荧光定量PCR检测结果显示瓜实蝇成虫体内的hsp90基因相对表达量均显著高于对照组；在处理1h后,雌雄虫体内hsp90的表达量均最高.[结论]瓜实蝇hsp90基因同双翅目昆虫hsp90基因家族相似性较高,序列表现为高度保守；瓜实蝇hsp90基因能被高温诱导表达,推测该基因在瓜实蝇耐热性过程中起着重要作用.
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