一个凡纳滨对虾新型溶菌酶(i-2型)的基因克隆,诱导表达与抗菌活性分析

来源 :第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cqcd1996
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  在本研究中,我们从凡纳滨对虾中分离到一个编码无脊椎动物型(i型)溶菌酶的基因。这个新获得的凡纳滨对虾溶菌酶在氨基酸序列上与斑节对虾i-2型溶菌酶类似,而与之前报道的凡纳滨对虾c型和i-1型溶菌酶差异较大。因此,我们把这个新的基因命名为凡纳滨对虾i-2溶菌酶(lyz-i2)。在所有我们检验的组织中,均能检测到lyz-i2转录本,其中最高丰度表达出现在血淋巴中。哈氏弧菌刺激会提高凡纳滨对虾肝胰腺、肠道、肌肉、鳃和血淋巴中lyz-i2的mRNA表达。其中在血淋巴中,弧菌和脂多糖(LPS)刺激对lyz-i2表达的提升分别是长久和短暂的,而聚肌胞苷酸PloyIC刺激则对lyz-i2表达没有影响。我们通过大肠杆菌表达系统获得了凡纳滨对虾lyz-i2的重组蛋白。在平板溶菌和浊度分析中,重组凡纳滨对虾lyz-i2均表现出较高的抗溶壁微球菌和各种弧菌的活性,而对大肠杆菌的活性则较低。本研究表明,凡纳滨对虾i2型溶菌酶在其先天免疫系统中是一个有效的抗菌蛋白。
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