RUNX2/E3连接酶SMURF1信号反馈通路调控成牙本质细胞定向分化

来源 :第九次全国牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feiying7405
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  目的:转录因子Runt-related transcription factor 2 (RUNX2)在骨和牙齿发育中发挥重要的调控作用.已证实成骨细胞分化中Smad ubiquitylation regulatory factor-1 (SMURF1)与RUNX2间存在交互作用(SMURF1通过介导RUNX2泛素化降解抑制成骨细胞分化而RUNX2在转录水平调控SMURF1表达).本研究旨在探讨RUNX2和SMURF1调控通路在成牙本质细胞分化中的作用.方法:RUNX2或SMURF1慢病毒shRNA转染牙髓干细胞,定量PCR(qPCR),western blotting,双荧光素酶报告基因和染色体免疫共沉淀(ChIP)检测牙髓干细胞内RUNX2和SMURF1相互作用以及RUNX2/SMURF1信号反馈通路在成牙本质细胞定向分化中的作用.结果:在牙髓干细胞内抑制SMURF1表达RUNX2蛋白表达降低但RUNX2mRNA无显著改变(P>0.05),进一步的实验表明抑制SMURF1表达RUNX2半衰期延长,泛素化蛋白降解减少,证实SMURF1调控RUNX2泛素化降解过程.在牙髓干细胞内抑制RUNX2表达SMURF1表达在蛋白和转录水平均降低,双荧光素酶报告基因和染色体免疫共沉淀证实RUNX2可结合SMURF1启动子区调控其转录活性.SMURF1 Knockdown后牙髓干细胞成牙本质细胞分化抑制,矿化程度虽然增强但成牙本质细胞分化特异性蛋白DSPP,DMP-1表达降低.结论:RUNX2/SMURF1交互信号通路参与调控RUNX2表达并在成牙本质细胞定向分化中发挥重要作用.
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