【摘 要】
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目的:建立以极化荧光为检测方法的高通量筛选技术,通过大规模筛选发现氧化型低密度脂蛋白-1受体(LOX-1)的天然配体.方法:密度梯度超速离心获得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),
【出 处】
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第七届全国青年药学工作者最新科研成果交流会
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目的:建立以极化荧光为检测方法的高通量筛选技术,通过大规模筛选发现氧化型低密度脂蛋白-1受体(LOX-1)的天然配体.方法:密度梯度超速离心获得正常人血中低密度脂蛋白(LDL),然后用CuSO<,4>(5μmol·L)修饰为氧化型低密度脂蛋白(oxLDL).FITC标记人LOX-1,以受体(LOX-1)和配体(oxLDL)的相互作用为基础建立筛选模型,用极化荧光检测方法,在激发光485nM、发射光525nM,对3200个样品进行高通量筛选,并用Z因子值评价实验.结果Z因子值为0.75,根据建立的基于极化荧光的高通量筛选实验方法,发现3个化合物与LOX-1有较高的结合活性,IC<,50>值小于40μmol·L.结论:本研究建立的以极化荧光为检测方法适合于高通量筛选技术,具有较高的稳定性、灵敏性和可重复性.
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