头孢菌素类药物是一大类具有β内酰胺环的广谱抗菌药，具有杀菌力强、对于酸和β-内酰胺酶比青霉素稳定等优点。然而该类抗生素在动物养殖过程中的不规范使用会残留蓄积于动物体内，长期食用含该类药物残留的动物源性食品会增加人类感染抗药性细菌的风险，且对于对该类抗生素有过敏反应的人群而言存在极大的健康威胁。但现有的头孢类药物检测方法普遍存在前处理复杂、专属性不高、通量低等缺点，无法达到对头孢菌素类物质的筛查监测；且部分头孢类物质分子量和液相保留时间都极为相近，依照传统LC-MS/MS检测技术进行实验时难以分辨。本研究使用超高效液相色谱Q-Orbitrap高分辨质谱联用技术建立了一套可食性动物肌肉组织中多头孢菌素类药物残留筛查方法，及适用于肌肉组织中多头孢菌素残留筛查的前处理基质净化技术，该法对于头孢类药物的分辨率均达到2ppm以下。可应用于动物源性食品中头孢菌素类药物残留阳性样品的筛查及确证实验中。此外，采用高分辨质谱Full MS/ddMS2监测模式可得到高分辨二级碎片离子，对头孢类物质的质谱裂解规律进行研究后选出的高分辨率二级离子可以达到更准确的定性结果。实验中以可食性动物肌肉组织为样本，经乙腈-水溶液提取后，采用基质吸附SPE前处理净化技术可以快速达到对目标物的净化和富集目的。此外，在目标物液相分离方面，本研究对比包括C18柱、苯基柱、C8柱、HILIC柱等五种液相色谱柱，首次将C8色谱柱应用于头孢类物质的液相分离中，经Q-Orbitrap高分辨质谱检测，头孢类物质可完全分离，色谱峰型及质谱响应良好，可达到对研究的四十余种头孢类物质的筛查定性及定量分析中。方法 具有高灵敏度、高选择性、方便快速、操作简单等优势，已成功应用于首都及周边地区270例肌肉样品检测中。经验证，该法同样适用于牛奶和动物内脏组织中头孢菌素类药物的筛查。