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近年来,代谢组学的发展为农药作用机制研究提供了强大的分析工具.为了建立杀菌剂作用机制快速分类识别方法,寻找不同机制杀菌剂对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)作用的生物标志物,本文对B.cinerea代谢组及其在6类杀菌剂作用机制区组中的应用进行了系统研究.主要获得了以下几方面的研究结果：基于GC-MS分析平台建立了B.cinerea菌丝代谢组提取检测方法,代谢组提取溶剂为甲醇/水(v/v,80/20),提取剂量为每0.1g菌丝4mL溶剂,两步衍生化：30℃下甲氧基胺盐酸盐衍生化2h,37℃下BSTFA硅烷化6h.检测获得的B.cinerea代谢组,包含了245种代谢物,主要由氨基酸类、有机酸类、醇类、糖类等组成.其中,与NIST 2005匹配度大于80％的代谢物有56种.基于浓度为EC50的杀菌剂作用下GC-MS检测到的B.cinerea代谢指纹,采用IBM SPSS Statistics 21软件对供试的14种杀菌剂进行了层次聚类分析,其中呼吸作用抑制剂嘧菌酯和醚菌酯聚为一类；蛋氨酸合成抑制剂嘧霉胺和嘧菌环胺聚为一类；信号传导抑制剂腐霉利、异菌脲和咯菌腈聚为一类；甾醇合成抑制剂苯醚甲环唑和四氟醚唑聚为一类；多作用位点抑制剂福美双和百菌清聚为一类；聚类结果与FRAC作用机制类别一致,表明通过代谢指纹的系统聚类可以实现对杀菌剂作用机制的区组.β微管蛋白合成抑制剂多菌灵和甲基硫菌灵处理的菌株代谢组存在显著差异,聚类的距离较远,可能与甲基硫菌灵未经寄主活化有关.本研究中氟啶胺与嘧菌酯和醚菌酯距离较远,表明虽然同为呼吸作用抑制剂,但解偶联剂与复合物Ⅲ抑制剂在代谢组上存在显著差异.分析了多种作用机制杀菌剂在EC50浓度下对B.cinerea代谢组的影响,并获得了各类作用机制杀菌剂处理下病原菌代谢组中特征性调整的代谢物,这些代谢物为该类作用机制杀菌剂的潜在生物标志物,研究结果将为新杀菌剂作用机制的快速预测识别提供有效方法.