【摘 要】
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本文采用海藻酸钠作为载体,采用乳化复沉淀方法包裹迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)全菌制备疫苗微球。制备工艺研究结果表明:3%(m/v)海藻酸钠溶液,4%(m/v)Ca Cl2溶液,水
【机 构】
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天津市水生动物疫病预防控制中心; 天津渤海水产研究所; 天津师范大学生命科学学院;
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本文采用海藻酸钠作为载体,采用乳化复沉淀方法包裹迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)全菌制备疫苗微球。制备工艺研究结果表明:3%(m/v)海藻酸钠溶液,4%(m/v)Ca Cl2溶液,水油相比1:2,1%Span80乳化剂,搅拌速度1200rpm为最佳制备工艺,微球包埋率达91.04%,微球平均粒径16.51±11.87μm。微球在体外人工模拟胃液和肠液16h释放率分别为0.8%和98.1%。用表达有绿色荧光蛋白的大肠杆菌做示踪标记,口灌免疫褐牙鲆(Pleuronectiformes),结果表明微球能通过消化道到达后肠,冰冻切片可以看到后肠对荧光微球的吸收。免疫保护效应研究表明,疫苗组在初免后第14天血清效价达到峰值1:512;外周血白细胞吞噬率在初免后第21天达到峰值27.06%。初免第28天后用活菌攻毒,免疫保护率为77.33%。本研究优化了鱼类肠溶口服疫苗的制备工艺,疫苗评价结果表明,该口服疫苗可以有效激活鱼体免疫反应,预防鱼类疾病的发生。
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