【摘 要】
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以南极磷虾中分离的59株菌为研究对象,利用酪蛋白水解圈法对其进行产蛋白酶菌株的筛选,并对菌株的形态特征及部分生理生化特征进行研究,以比浊测定法对活性菌株生长的部分特性包括生长曲线、产酶曲线、最佳温度、最佳pH、最佳盐度进行研究,以福林酚法对蛋白酶酶活以及其部分酶活特性包括蛋白酶作用最适温度、最佳pH、热稳定性等进行探宄.以l6S rRNA基因扩增法和Mega5邻接法对活性菌株进行系统发育树的构建及
【机 构】
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上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306
【出 处】
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2016上海市食品学会年会暨上海市“食品·创新·绿色·共享”研究生学术论坛
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以南极磷虾中分离的59株菌为研究对象,利用酪蛋白水解圈法对其进行产蛋白酶菌株的筛选,并对菌株的形态特征及部分生理生化特征进行研究,以比浊测定法对活性菌株生长的部分特性包括生长曲线、产酶曲线、最佳温度、最佳pH、最佳盐度进行研究,以福林酚法对蛋白酶酶活以及其部分酶活特性包括蛋白酶作用最适温度、最佳pH、热稳定性等进行探宄.以l6S rRNA基因扩增法和Mega5邻接法对活性菌株进行系统发育树的构建及系统发育分析.结果 发现,从59株菌中筛出两株产蛋白酶菌株,编号分别为A1-2、B1,其酶活分别为32.19U/ml和289.55U/ml,两株活性菌株分别在培养8、16h进入对数期,32、56h达到稳定期.菌株分别培养20、36h时开始产酶,培养104、100h酶活达到最高.菌株生长的最佳温度分别为25、20℃,最佳pH均为7,最佳盐度分别为5％、2％,对其蛋白酶活部分特性进行研究发现,菌株A1-2、B1所产蛋白酶作用的最佳温度分别为30℃和60℃,酶活的最佳pH分别为9.5和9.0,菌株A1-2所产蛋白酶0℃仍可保持2 0％的酶活力,但热稳定性较差,为典型的低温蛋白酶.而菌株B1所产蛋白酶作用的最适温度虽为60℃,为典型的中温蛋白酶,但是其在0℃c仍可保持10％的酶活力,20℃c仍有60％的酶活力,且在最适温度下并不稳定,与报道中的其他中温蛋白酶有所不同.结合菌株的表型特征、生理生化特征及系统发育分析结果表明,菌株A1-2可能属于动球菌属的新种,菌株B1属于寡养单胞菌属的一种.
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