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CBF基因是植物抗寒过程中一个关键的转录因子。根据已发表序列设计合成引物，以枳壳总基因组DNA为模板克隆CBF及其启动子序列，在产物5端引入Sall酶切位点。同时根据NCBI里的PX6-CFP序列设计引物，以PMV载体为模板扩增GFP，在产物3端引入sall酶切位点。通过sall酶切连接构建融合基因CC。通过酶切连接将融合基因CG导入表达载体pCAMBIA2301，构建一个新的融合基因表达载体CG2301，在农杆菌介导下将融合基因转入柑橘中，试图通过GFP的荧光来检测CBF的时空表达情况，目前已筛选出抗性芽，长势良好，转化仍在进行中。载体的构建为CBF功能验证及柑橘的遗传转化奠定了基础。