唾液酸是一种九碳糖神经氨酸,是糖蛋白、低聚糖、糖脂的主要成分.作为一种天然的生理活性物质和糖蛋白的重要糖基化组分,唾液酸在机体、器官或组织内的含量水平能反映许多重要的生理信息.研究发现,肿瘤患者的血清中SA含量普遍高于正常人的水平;燕窝、母乳等食品中唾液酸的含量与它们的营养价值有密切关系.因此,准确测定生物样品中的唾液酸含量成为了当前唾液酸研究的一个热点,也建立了许多种测定不同生物样品中唾液酸含量的方法,如液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、毛细管电泳、质谱检测法和高灵敏度的SERS检测法等.本研究以马血浆为样品,对其中唾液酸含量的高效液相色谱检测方法进行了研究,通过对唾液酸水解反应温度、时间、水解试剂的浓度,衍生化反应温度、时间、衍生化试剂的浓度以及检测条件的多方面的优化,确定了一种可以准确测定马血浆中唾液酸总含量的高效液相色谱检测方法.由于血浆中的唾液酸主要存在于糖蛋白中,所以首先采用三氟乙酸进行糖蛋白的水解进行唾液酸的释放,最佳的水解条件为:水解温度,80℃;水解时间,90min;三氟乙酸浓度,500mmol/l,.水解产物进行固相萃取后采用40 mg/ml邻苯二胺盐酸盐在80℃衍生化40 min,收集衍生化产品进行过滤后采用SUPELCOSIL LC-18(250 mm×4.6 mm,5 μm)进行高效液相色谱检测,紫外检测波长220nm,流动相:流动相A和流动相B(86:14)(V:V),流动相A含有0.15 ％丁胺,0.25 ％磷酸,1 ％四氢呋喃,流动相B含有流动相A和乙腈(50:50)(V:V),流速1 ml/min,进样体积20 μl.在此条件下,可以检测出马血浆中最低浓度为0.2 mg/l的唾液酸,检测结果的相对偏差RSD为0.5 ％-2 ％,回收率为95 ％-105 ％.本方法不仅可以用于马血浆中唾液酸的快速测定,也可以用于测定其他动物血浆和血清样品中唾液酸的含量,有助于动物血浆中唾液酸及与唾液酸相关的糖蛋白研究.