广西伪狂犬病毒流行株的分离鉴定及遗传变异分析

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shinmagi
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  引言 2011年以来,我国各省先后暴发伪狂犬病(AD)疫情,特别是许多已免疫了伪狂犬病毒(PRV)疫苗的猪场仍然发生疫情,提示当前流行的PRV在病原性上发生了新的变化.本研究对采集自广西某猪场疑似PRV感染的动物的样品进行病毒分离鉴定和序列分析,为广西PRV新流行毒株的防控提供有益参考.材料与方法 采集广西北海发生疑似AD疫情猪场的犬和猪样品,进行动物接种试验及病毒分离.对分离毒进行PCR鉴定及电镜观察.参照文献方法扩增PRV gE和gC基因,克隆测序后进行遗传进化分析.结果与讨论 本研究成功分离到2株PRV毒株,分别命名为GXBH1(犬源)和GXBH2(猪源).病毒滴度分别为105.5 TCID50/0.1 mL和105.25 TCID50/0.1 mL.2株分离毒与GenBank上登录的参考毒株gE和gC基因核苷酸序列同源性为97.4~ 100%和91.3~99.8%;氨基酸序列同源性为95.1~100%和86.6~99.5%.进化分析显示,2株分离毒与国内不同时期的毒株在进化树上共同构成一个进化分支,与欧洲和美洲的毒株亲缘关系较远.2株分离毒在gE蛋白第58位和第495位氨基酸附近均插入了1个天冬氨酸残基(D),但决定毒力的关键位点第125-126位(VC)未发生突变;2株分离毒gC蛋白在59-69位之间出现一个高变区,导致抗原-抗体结合区域位置后移,并且结合域序列也出现了多处的变异,提示与Bartha株相比,2株分离毒gC蛋白的免疫原性可能发生了改变.基于gE蛋白与gC蛋白的分析,虽然与国外毒株(Rice和Bartha)相比存在多个氨基酸位点的变异,但是国内不同年代的毒株变异情况基本一致.结论 本研究分离到2株PRV,通过遗传进化分析发现,2株分离毒与中国境内的PRV一起形成了一个独立的进化群.
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