异育银鲫病原杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的分离鉴定及ELISA检测方法的建立

来源 :第十二届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fqdml
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  2012年2月江苏扬州市某异育银鲫养殖场养殖的异育银鲫亲鱼出现大量死亡,症状表现为:病鱼口腔、鳃盖边缘、鳍条基部及鱼体尾柄处充血,眼球凸出,部分病鱼背鳍及尾鳍末梢鳍条呈蛀蚀状开裂,腹部肿胀并有铜钱般大小溃疡,个别病鱼有竖鳞现象.解剖可见肠道无食物,腹腔内有淡黄色积液,肝脏发白.从肝脏、血液中分离到大量优势生长的细菌,人工感染试验证实供试菌YZ-1对健康银鲫具有很强的致病性.对供试菌进行了细菌学鉴定,同时测定了代表菌株的16S rRNA基因序列,长度为1446 bp,Genbank收录号为JX164202.结合分离菌的表型及分子生物学分析,判定该菌为气单胞菌属的杀鲑气单胞菌杀鲑亚种.应用ELISA技术,建立了快速检测杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的方法,结果显示最佳抗原包被浓度和免疫血清最佳工作浓度分别为106 CFU/mL和1:8000,酶标二抗的最适工作浓度为1:8000,病原菌检测灵敏度为每孔103 CFU,与嗜水气单胞菌、鳗利斯顿氏菌、柱状嗜纤维菌、鮰鱼爱德华氏菌、荧光假单胞菌和灿烂弧菌均无交叉反应,该方法具有快速、灵敏、实用等特性,为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的有效检验提供了一定的参考依据.
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