【摘 要】
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目的:探究子宫颈鳞癌细胞p16ink4a基因异常表达与HPV16E6、E7基因的相关性.
方法:构建HPV16E6、E7基因过表达质粒pcDNA3.1-HPV16E67.采用脂质体法将HPV16E6、E7基因过表
【出 处】
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第十六届全军病理学术会议暨第十届全军病理专业委员会会议
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目的:探究子宫颈鳞癌细胞p16ink4a基因异常表达与HPV16E6、E7基因的相关性.
方法:构建HPV16E6、E7基因过表达质粒pcDNA3.1-HPV16E67.采用脂质体法将HPV16E6、E7基因过表达质粒及对照空质粒分别转染至HCC94细胞,实时荧光定量PCR法检测两组HCC94细胞中E6、E7及p16ink4a基因mRNA表达水平,Western blotting检测两组HCC94细胞中E6、E7及p16ink4a蛋白表达水平.设计合成E6、E7基因特异性shRNA表达质粒,将干扰质粒及空质粒载体经脂质体介导分别转染至Caski细胞中,实时荧光定量PCR法检测两组Caski细胞中E6、E7基因沉默效率及p16ink4a基因mRNA表达水平,Western blotting检测两组Caski细胞中E6、E7及p16ink4a蛋白表达水平.
结果:转染HPV16E6、E7基因过表达质粒的HCC94细胞较转染空质粒载体的HCC94细胞相比,其E6、E7及p16ink4a在mRNA和蛋白水平上表达量均明显增高.转染HPV16E6、E7基因干扰质粒的Caski细胞较转染空质粒载体的Caski细胞相比,其E6、E7及p16ink4a在mRNA和蛋白水平上表达量均明显降低.
结论:子宫颈鳞癌p16ink4a基因的异常表达与HPV16E6、E7基因存在一定的正相关性.
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