【目的】美洛昔康是一种新型非甾体类抗炎药,具有良好的抗炎、镇痛、解热作用,且引起胃肠道和肾脏不良反应的发生率较其他同类药物显著降低。本实验旨在建立快速高效,节约成本,灵敏度高的检测方法为研究美洛昔康在牛体内的药代动力学特征以期制定合理的给药方案奠定基础。【方法】取1 mL奶样于10 mL离心管中,加入20μL5 MNaOH,涡动30s,在4℃,9000 rpm,离心3 min,取上清于新的10mL离心管中,加入200μL 1 M HC1,5 mL乙酸乙酯,涡动1 min,4℃,9000 rpm,离心3 min,离心取上清,再加入3 mL乙酸乙酯于沉淀中进二次提取,取上清,合并两次上清液;上清液于45℃氮吹至干,用200μL流动相复溶,涡动后过0.2μm滤膜,进行HPLC分析。色谱条件:C18色谱柱（2.1×250mm,5μm）,流动相为0.1%甲酸甲醇:0.1%甲酸水（75:25,v/v）,检测波长:355nm,流速:1.0mL·min^-1。在10 ng·mL^-1,15 ng·mL^-1,30 ng·mL^-1三个浓度进行添加回收实验。【结果】血浆中美洛昔康在10-2000ng·mL^-1的浓度范围内,方法线性关系良好,相关系数r²为0.9998。定量限（LOQ）和检测限（LOD）分别为10 ng·mL^-1,8 ng·mL^-1。三个添加浓度的回收率在80.1%-101.4%;日内和日间变异系数均小于13.6%。待测药物在冻融过程中的稳定性、室温条件下药物的稳定性、待测物在前处理后的稳定性、长期稳定性、储备液稳定性等5个稳定性试验的变异系数均低于13.2%。【结论】建立的HPLC-UV检测方法快捷灵敏,满足残留检测要求。采用酸碱萃取法进行前处理,整个过程需要大约1 h,实验过程中无需过SPE柱,节约成本。