鹅血液基因组DNA的廉价高效提取方法研究

来源 :第十四届全国家禽科学学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shenshenxiaomo
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本研究针对家禽血液红细胞有细胞核的特点,研究适合鹅血液基因组DNA的廉价、简便、快速的基因组DNA提取方法,并为其他家禽提供参考。裂解细胞,然后利用简便经济的操作将蛋白质和核酸分离,去除杂质、沉淀核酸,即通过裂解和纯化两大步骤,获得基因组DNA,并通过基因扩增检测其质量和效果。该方法提取的基因组DNA电泳检测条带明亮,无拖尾,含量及纯度均较高,能够用于分子生物学实验研究。与传统的酚-氯仿DNA抽提方法相比,本实验建立的血液基因组DNA提取方法具有成本低、操作步骤简便和快速的特点,特别是对大量样品的提取更为实用。
其他文献
本实验荧光定量PCR技术检测了MyoG基因在鸭胚胎发育第10天至出生后7天小肠组织中的表达情况,结果表明:MyoG基因在鸭胚胎形成后小肠组织中的表达呈现规律性,MyoG mRNA水平从E10d至E14d呈下降趋势,在E18d达到高峰,随后逐渐降低,且各个阶段表达水平差异显著(P<0.05)。初步推断:MyoG基因可能参与了小肠组织的发育或者调控了其功能。
本试验通过PCR-RFLP方法检测Mx基因S631N多态位点的等位基因A和G在白耳鸡群体中的分布,通过选配组建三种不同基因型群体(AA,AG,GG),免疫后分别于35、42、49、70、100日龄采用血凝和血凝抑制方法测定不同基因型个体的禽流感(AI)和新城疫(ND)抗体滴度,分析该多态位点与免疫性状的关联。结果表明,在白耳鸡群体中Mx基因S631N多态位点的等位基因频率处于Hardy-Weinb
[目的]为探讨半抗原结构对抗体特性的影响,最终建立高灵敏度的呋喃它酮酶联免疫检测方法.[方法]首先用吗啡啉和环氧氯丙烷合成呋喃它酮代谢物5-甲基吗琳-3-氨基-2-恶哇烷酮(AMOZ),再经对醛基苯甲酸、溴丁酸乙酯、丁二酸酐等试剂将AMOZ衍生化合成四种不同结构的半抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、V,经活性酯化法分别与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成偶联比不同的8种免疫原和8种包被原.将8
[目的]沙门菌是奶牛子宫内膜炎和乳房炎的主要致病菌.沙门菌菌型繁多,分布广泛.目前已确认的沙门菌属有2500余种血清型.为了揭示奶牛源沙门菌的致病作用及致病作用机理,对内蒙古地区奶牛源沙门菌进行了分离及致病性研究.[方法]采用选择鉴别培养法从奶牛乳房炎和奶牛子宫内膜炎的460份病料中分离出致病性沙门菌38株;应用生化试验、A-F多价诊断血清凝集试验对分离的疑似沙门菌菌株进行分型和鉴定;采用腹腔注射
Tet-on系统是一种高效无毒、具有严密开/关功能的基因调控系统。脂质体转染法是较为常用的将外源基因转入细胞的方法,在转染过程中,很多因素会影响脂质体的转染效率,为了尽可能提高转染率及外源基因的表达水平,试验中对转染及诱导表达条件进行了优化。结果表明:当pBI-EGFP-EGFP:pCAGGS-rtTA2s-M2为1∶2,质粒DNA:LjpofectemineTM2000为1∶2.5,转染后6h加
以杏花鸡与隐性白洛克鸡为亲本构建的F2代全同胞家系为资源群,分析了鸡Contig.NW_001471529.1上一个SNP(rs15343813)的多态性及其与鸡屠体性状和生长性状的关联性。研究发现,rs15343813的多态性和鸡的脂肪性状显著关联。对于腹脂重(g),三种基因型的最小二乘均值差异极显著(P=0.002 0);CC、TC、TT三种基因型腹脂重的最小二乘均值分别为:55.986±7.
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为有效保护地方鸡种的遗传多样性,规范地方鸡的活体保种行为,特制定本方案。方案对地方鸡种活体保种场基本设施要求、保种目标、保种方法、保种效果监测方法、记录与档案管理等方面提出了基本要求。
本试验以皖西白鹅为试验材料,选择产前一周作为对比,运用实时定量PCR技术对鹅生殖周期内PRL基因在垂体、下丘脑、卵巢的表达进行分析,结果表明:产蛋期垂体、下丘脑和卵巢中PRL基因表达量依次降低,且垂体和卵巢、下丘脑和卵巢表达差异显著(P<0.05);就巢期PRL基因表达量均高于其他各时期PRL基因表达量,表达差异极显著(P<0.01),另外就巢前期各组织中PRL基因表达量均显著高于其他时期其PRL