【摘 要】
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[目的]为探讨半抗原结构对抗体特性的影响,最终建立高灵敏度的呋喃它酮酶联免疫检测方法.[方法]首先用吗啡啉和环氧氯丙烷合成呋喃它酮代谢物5-甲基吗琳-3-氨基-2-恶哇烷酮(AMOZ),再经对醛基苯甲酸、溴丁酸乙酯、丁二酸酐等试剂将AMOZ衍生化合成四种不同结构的半抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、V,经活性酯化法分别与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成偶联比不同的8种免疫原和8种包被原.将8
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广东广州510642
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
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[目的]为探讨半抗原结构对抗体特性的影响,最终建立高灵敏度的呋喃它酮酶联免疫检测方法.[方法]首先用吗啡啉和环氧氯丙烷合成呋喃它酮代谢物5-甲基吗琳-3-氨基-2-恶哇烷酮(AMOZ),再经对醛基苯甲酸、溴丁酸乙酯、丁二酸酐等试剂将AMOZ衍生化合成四种不同结构的半抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、V,经活性酯化法分别与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成偶联比不同的8种免疫原和8种包被原.将8种免疫原免疫BALB/c小鼠,间接ELISA和间接竞争ELISA测定抗体效价和抑制率.再通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,取特异性较好的单克隆抗体与8种不同的包被原进行同源性和异源性抗原抗体配对,测定不同组合的灵敏度,筛选出最佳组合经条件优化最终建立ELISA方法.[结果]结果表明在同源性配对条件下所有组别的鼠血清多克隆抗体对AMOZ无抑制,但Ⅰ组、Ⅱ组对CPAMOZ的亲和力高、抑制效果好.筛选出阳性细胞株4E8,其抗体最佳稀释倍数及Ⅱ-OVA2包被抗原最佳质量浓度分别为1∶10×104、0.75 μg/mL.建立了的ELISA方法,IC50CPAMOZ =0.13ng/mL,IC50NPAMOZ =0.11 ng/mL.通过四参数法拟合得到的标准曲线回归方程为y=4.49+94.35/(1+(x/0.13)^1.40),R2 =0.9994.[结论]建立的ELISA方有助于高灵敏度快速检测试剂盒的研制法,可用于呋喃它酮代谢物的残留检测.
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[目的]评价郑州牧专研制的头孢噻呋不同混悬液的治疗效果.[方法]用试管二倍稀释法,测定头孢噻呋(CEF)、头孢噻呋-他唑巴坦(CEF-T)混悬液、头孢噻呋-他唑巴坦-恩诺沙星(CEF-T-E)混悬液的体外抑菌作用.用诱导产生ESBLs的大肠埃希菌菌株制备人工感染模型,设立健康对照组、感染对照组,以头孢噻呋粉针为治疗对照组,比较CEF混悬液、CEF-T复方混悬液,CEF-T-E混悬液以低、中、高三个
[目的]为了对新型复方注射液进行质量控制和稳定性考察,[方法]采用HPLC-UV法检测注射液中氟尼辛葡甲胺的含量.色谱柱为Hypersil ODS2(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.1％磷酸水(80∶20)为流动相；检测波长254 nm；柱温30℃；流速1 mL/min.量取该注射液1ml,置100 ml量瓶中,精密称定,加流动相稀释并定量至刻度,摇匀,进样量为10 ml,记录色谱图
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本文介绍了我国水禽产业基本情况，提出我国产业发展的技术要求，指出我国水禽产业技术的重点任务是解决我国水禽产业资源高效利用、保护环境、改善产品品质、实现标准化生产面临的关键技术问题。基础性工作则主要围绕水禽产业可持续发展问题建立基础性、公益性技术平台，由国家水禽产业研发中心更功能研究室和综合试验站协作完成。
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