【摘 要】
：
采用基因工程表达技术对实验室已经构建的BR-WT-PMD-19-T/DH5α菌株通过PCR技术扩增出CDEF四个α螺旋小分子片段,同时在片段的两端引入半胱氨酸为后期的单分子实验奠定基
【机 构】
：
中国石油大学(华东)-生物工程与技术中心-蛋白质分子工程实验室,青岛
【出 处】
：
中国化学会第三届全国生物物理化学会议暨国际华人生物物理化学发展论坛
论文部分内容阅读
采用基因工程表达技术对实验室已经构建的BR-WT-PMD-19-T/DH5α菌株通过PCR技术扩增出CDEF四个α螺旋小分子片段,同时在片段的两端引入半胱氨酸为后期的单分子实验奠定基础.采用大肠杆菌异源表达蛋白的方法制备出融合蛋白；再以亲和层析、酶切、凝胶过滤层析等手段得到比较纯净的目的蛋白；最后以荧光光谱仪、圆二色谱仪、紫外可见光谱、单分子荧光技术为主要研究手段,对BR片段小分子蛋白构象进行细致的表征.优化了BR片段小分子蛋白的表达条件,并对酶切条件进行了摸索,将脱盐片段融合蛋白样品交换至Buffer A中,表面活性剂FC-14浓度0.1％,加入终浓度为5mM DTT,5 mM EDTA(0.5 M,100 uL),PH=7.0,4℃酶切24 h,得到较好的酶切效果.再经过纯化、凝胶层析等手段最终可纯化出BR-CDEF单体.所得单体经CD检测有二级结构,且可被AF488、AF647两种染料成功标记.
其他文献
核医学科为利用放射性物质进行诊断、治疗和医学研究的先进学科,在临床诊疗及预后评估中占据重要地位.由于在核医学科中应用的放射源存在一定的辐射损害,一旦发生管理失误或
目的:分析优质护理服务在老年性脑梗死护理中的应用价值.方法:选择2019年1月至2020年6月在本院救治的68例老年性脑梗死患者,信封随机抽选法划入优质组与参照组(n=34).参照组
笔者根据临床护理经验,分析了卵巢过度刺激综合征的发病机制,从病情观察、一般护理、液体管理、并发症的护理、心理护理、预见性护理五个角度阐述对卵巢过度刺激综合征患者的
目的:分析钝针扣眼穿刺在老年患者维持性血液透析中的应用意义及护理效果.方法:本次研究选取2018年12月-2019年12月期间于我院进行维持性血液透析的老年患者90例,随机分为两
目的:探讨健康教育与心理护理在无痛胃镜检查中对病人护理满意度的提升效果.方法:以随机均分法将200例无痛胃镜检查患者分成两组.均开展常规护理,观察组在此基础上添加健康教
Noble metal nanoparticles,such as gold and silver,are known to display interesting phenomenon called Plasmon resonance,which could be utilized to enhance li