几丁质酶基因的亚克隆及其转化苏云金杆菌

来源 :中国植物病理学会第六届代表大会暨学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdrb_123456
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该研究证明苏云金芽孢杆菌体外添加粘质沙雷氏菌分泌的几丁质酶粗提物可以明显地提高其对棉铃虫的杀虫效果。将该实验室前期工作中克隆所得的8.0kb几丁质酶片断亚克隆至6.5kb,连接于苏云金杆菌-大肠杆菌的穿梭载体pHT370上,构建成重组载体pHT7065,转化大肠杆菌后,几丁质酶基因获得表达,利用电击转化的方法,将pHT7065转化BtHD73菌株,在电容21.5uF,电压8.0kv条件下,可以得到较高的转化率的1.8×10〈’2〉转化子/μgDNA,阳性克隆子经southern杂交证实转化成功。但在新寄主中,几丁质酶基因的表达出现困难,其原因还有待进一步研究。
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