受照射巨噬细胞对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响以及内皮细胞的介导作用研究

来源 :安徽省核学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yongshuai520
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  动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)是常见的心血管疾病之一,辐射可导致AS发病率的增加.本研究利用transwell小室来建立多细胞共培养体系,研究受照射U937巨噬细胞对血管平滑肌HUSMC细胞增殖以及迁移的影响,同时,观察血管内皮HUVECs细胞的介导作用.采用受照射HU937细胞的条件培养液处理HUSMC后,应用CCK-8法检测HUSMC的增殖.利用transwell小室建立U937和HUSMC两种细胞或U937和HUVECs、HUSMC三种细胞共培养的体系,观察受照射U937细胞对HUSMC增殖及迁移的影响,并检测受照射U937细胞上清中肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量变化.同时,检测共培养体系上清中MCP-1、IL-6的含量,以及HUSMC内MCP-1和IL-6的基因表达.此外,单独采用外源性TNF-α预处理HUVECs,以观察细胞内IL-6的表达改变.结果显示,受照射U937细胞的条件培养液可促进HUSMC的增殖,并且在共培养体系中进一步提高HUSMC的增殖能力.ELISA检测结果显示,受照射U937细胞上清液中的TNF-α含量随着受照时间推移而逐渐增加,且共培养体系中HUVECs内的TNF-α表达升高,HUSMC内及上清液中MCP-1和IL-6的mRNA和蛋白表达均增加.在外源性的TNF-α预处理HUSMC后,可以诱导HUSMC内IL-6 mRNA的表达明显增加.并且与两种细胞共培养体系比较,在有HUVECs参与的三细胞共培养体系中,炎性因子IL-6的分泌增加更为显著.本研究结果表明,受辐射巨噬细胞可能通过分泌TNF-α促进HUVECs分泌炎性因子的能力增加,进而提高HUSMC的增殖与迁移能力.因此,受照射巨噬细胞产生的辐射旁效应对AS的形成可能具有重要的作用.
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