5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗增生性瘢痕的机制研究及初步临床应用

来源 :2015中华医学会整形外科学分会第十四次全国学术交流会暨第五届中国(福州)ISAPS美容整形外科高级研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:msdn_sdk
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  目的:探究5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-photodynamic therapy,ALA-PDT)对增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)成纤维细胞(Hypertrophic scar fibroblasts,HSF)生长特性的影响及具体机制,从而为ALA-PDT防治增生性瘢痕提供实验依据。临床初步应用观察其有效性。方法:分离培养5-6个HS患者的HSF,取第4-6代细胞用于实验;通过倒置荧光显微镜观察及测定不同ALA浓度(孵育5h)细胞内PplX的累积量的差异;通过MTT分析一定浓度梯度范围内(根据PplX的荧光累积量曲线)单用ALA与联合应用ALA-PDT对HSF的增殖影响的差异性;通过Hoechest33258染色及Annexin V/PI流式细胞学技术分别从细胞形态学水平和细胞群体水平检测ALA-PDT作用于HSF可能诱发的凋亡现象;ALA-PDT对HSF增殖抑制及诱导凋亡的潜在分子生物学机制探索:Westem-Blot技术分析不同浓度ALA-PDT作用于HSF后P53通路相关蛋白、TGF-B 1/Smad信号通路及VEGF/COX-2蛋白水平变化;通过Realtime-PCR技术检测HSF在ALA-PDT作用上述信号mRNA表达水平的变化,以进一步验证上述蛋白水平分析结果。临床按平均参数治疗增生性瘢痕。
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