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目的 建立Tet-On调控系统和Cre/LoxP基因剔除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶三转基因小鼠。方法 选择适龄并经鉴定的由Tet-on系统调控下肝脏特异性表达Cre重组酶的双转基因小鼠Lap/LC-1与由Tet-on系统调控下肝脏特异性表达荧光素酶(Luc)的双转基因小鼠Lap/NS3/4A交配,子代小鼠经PCR法检测、筛选基因组中NS3/4A、Lap、LC-1三个转基因片段均阳性的小鼠。三阳性的NS3/4A/Lap/LC-I小鼠经盐酸强力霉素(Doxycycline,Dox)诱导一周后,以在体生物发光成像系统(In vivo bioluminescent imaging,BLI)检测报告基因荧光素酶的的表达。免疫组化检测小鼠体内Cre重组酶、NS3/4A丝氨酸蛋白酶的表达状况。结果 NS3/4A/Lap/LC-1小鼠经Dox诱导后,BLI结果显示,仅在小鼠肝脏部位检测到强烈的发光信号,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。免疫组化结果证实Cre重组酶、NS3/4A蛋白酶仅在经诱导后后的小鼠肝细胞特异性表达。结论 建立了Tet-On调控系统和Cre/LoxP基因剔除系统双重调控下表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的三转基因小鼠模型,为进一步研究HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在HCV感染后与宿主相互作用的机制及抗NS3/4A丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂的筛选奠定基础。