[目的]预测抗原表位并利用重叠肽合成短肽的方法来鉴定出新疆出血热病毒核蛋白N 端和C 端区抗原表位。[方法]通过蛋白结构分析和B 细胞线性抗原表位预测软件对XHFV YL04057 株NP 蛋白进行了抗原表位预测；利用重叠肽合成法将NP N 端(NP1)和C 端(NP3)片段重叠16 肽引物构建到pXXGST-1 原核表达载体上，在大肠杆菌中诱导表达，经Western blot 法鉴定抗重组NP 蛋白的阳性16 肽，并对阳性片段继续进行8 肽的设计和表达，鉴定出最小B 细胞线性抗原表位基序；使用阳性动物羊血清对阳性8 肽来验证抗原基序的抗原性，并对鉴定获得的抗原表位基序进行保守型分析和三级结构分析。[结果]通过蛋白结构预测软件预测了可能的抗原表位，对NP1 片段和NP3 片段进行了重叠16 肽(48 个)和8 肽(58 个)寡核苷酸的设计，构建了质粒并进行诱导表达和Western blot 分析，最终获得了9 个最小B 细胞线性抗原表位基序。用天然感染XHFV 的阳性羊血清对9 个表位基序进行Western blot 验证，结果表明这9 个抗原肽都能与感染XHFV 的阳性羊血清结合，提示这些抗原肽未来可作为检测试剂用于动物或人是否在自然条件下感染XHF 病毒的鉴定及流行病学调查。[结论]本研究获得了9 个最小B 细胞线性抗原表位基序，为XHFV NP 蛋白全长基因抗原组学的研究以及XHFV 诊断试剂的研制及病毒治病机制的深入研究奠定了基础。