【摘 要】
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目的：通过BRUKER Sepsityper试剂盒和BD分离胶两种方法在血培养阳性标本直接鉴定结果比较,对两种方法进行评估.方法：收集138例血培养阳性标本(64例BD厌氧瓶74例BD需阳瓶),分别使用BD分离胶法和BRUKER Sepsityper试剂盒进行样品前处理.BD分离胶法：抽取6ml血培养液注入含分离胶BD真空采血管,1500转/分钟离心45分钟,弃去上清液,挑取分离胶表层沉淀接种在含
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院 上海 200127
【出 处】
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第三届临床微生物学与感染病学国际论坛暨全国微生物与人体健康学术会议
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目的：通过BRUKER Sepsityper试剂盒和BD分离胶两种方法在血培养阳性标本直接鉴定结果比较,对两种方法进行评估.方法：收集138例血培养阳性标本(64例BD厌氧瓶74例BD需阳瓶),分别使用BD分离胶法和BRUKER Sepsityper试剂盒进行样品前处理.BD分离胶法：抽取6ml血培养液注入含分离胶BD真空采血管,1500转/分钟离心45分钟,弃去上清液,挑取分离胶表层沉淀接种在含1ml无菌蒸馏水的EP管中,1 3000转/min离心2分钟；弃去上清液再加入1min无菌蒸馏水,充分震荡混匀,13000转/min离心2分钟,弃去上清待用.BRUKERSepsityper试剂盒：抽取1ml血培养液至EP管中,加200ul Lysis Buffer充分混匀10秒钟,13000转/min离心2分钟,弃去上清再加1ml Washing Buffer充分混匀后,13000转/min离心2分钟,弃去上清待用.在EP管中加入700ul乙醇,13000转/min离心2分钟,用移液器吸出乙醇弃去,再以13000转/min离心2分钟,用10ul移液器吸出管底乙醇,将含有细菌沉淀的EP管开盖静置5分钟(使残余乙醇挥发),加入30ul70％甲酸震荡混匀,静置5分钟后加入30ul乙腈,13000转/min离心2分钟,吸取1ul上清液点样到靶板上,干燥后加1ul基质液,待完全干燥后将靶板放入Bruker MALDI-TOF质谱仪采集质谱图,用Biotyper软件对质谱图进行比对分析获得鉴定结果.结果：138例血培养阳性最终培养结果是57例革兰阳性球菌,70例革兰阴性杆菌,3例真菌,2例混合菌和6例假阳性.我们以质谱鉴定得分1.800-2.99为高可信度；1.6-1.799或得分在1.6分以下但鉴定结果前5位均为同一菌种为低可信度,1.6分以下鉴定结果前5位是不同菌种为不可信,两种方法鉴定结果比较如下(Table.1 and Fig.1)：对需氧血培养瓶和厌氧血培养瓶中的革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的直接鉴定结果,BRUKER Sepsityper试剂盒法要好于BD分离胶法(Fig.2,Fig.3)讨论：血培养阳性标本直接萃取鉴定中,两种方法都有较好的鉴定结果.BRUKER Sepsityper试剂盒法较BD分离胶法标本前处理时间更短且鉴定结果的可靠性更高.
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