【摘 要】
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本研究旨在评价不同环境因素对于副溶血弧菌耐热直接溶血素(TDH)表达的影响.耐热直接溶血素为副溶血弧菌主要致病因子,其分泌受到多种环境因素影响,如温度,pH值,胆酸盐等
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本研究旨在评价不同环境因素对于副溶血弧菌耐热直接溶血素(TDH)表达的影响.耐热直接溶血素为副溶血弧菌主要致病因子,其分泌受到多种环境因素影响,如温度,pH值,胆酸盐等.本研究通过配制不同培养基,拟筛选出影响耐热直接溶血素表达的主要因素.本实验以副溶血弧菌ATCC33846为实验对象,调节盐(NaCl)浓度,pH值,培养基种类,培养温度,培养时间,牛黄胆酸(TCA)的添加量,根据正交实验表设计25组平行试验.以25组培养基分别培养副溶血弧菌ATCC33846后,将上清与等体积的1%人血细胞混合.37℃放置2h,4500 r/min离心3min后,OD540检测样品吸光值,并以H=(实验组-对照组)/(A100-A0)×100%计算毒素溶血率.获得到溶血率最高的培养基后,再以单因素及双因素实验确定毒素活性主要影响因素.结果显示,以含有2% NaCl,2mmol TCA且pH =7的LB为培养基,42℃培养12h时副溶血弧菌所分泌的溶血毒素溶血率最高.对各因素分析后发现,TCA的加入及温度的升高可极大促进溶血毒素的分泌,而pH值的降低亦对毒素分泌起到一定的促进作用.本研究结果显示,TCA、温度及pH值均可影响副溶血弧菌直接耐热溶血素的分泌;为了降低副溶血弧菌溶血毒素对消费者健康的影响,水产品在储运期间应避免高温和低pH值环境.
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