生防放线菌新型蛋白激发子PeSy1的筛选鉴定及诱导植物抗病机制研究

来源 :中国植物病理学会2023年学术年会论文集 | 被引量 : 0次 | 上传用户:veiri32
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杨凌糖丝菌(Saccharothrix yanglingensis) Hhs.015是本课题组前期从黄瓜根内分离鉴定的一株稀有生防放线菌,在田间试验中对多种病原菌具有优良的防治效果。研究表明Hhs.015能够定殖植物组织并增强植株抗病性,但该菌株关键的激发子及其诱导植物抗病机制尚不清楚。本研究利用农杆菌介导的瞬时表达系统,从Hhs.015预测的分泌蛋白组中筛选蛋白激发子,最终鉴定到一个能够在本氏烟草(Nicotiana benthamiana)中诱导细胞死亡的候选激发子基因PeSy1。生物信息学分析表明,PeSy1基因编码一个具有109个氨基酸的未知功能蛋白,并在糖丝菌属中保守存在。PeSy1-His重组蛋白诱导了植物早期防御事件,如组织活性氧迸发、胼胝质沉积和防御激素信号通路激活,并促进了烟草对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和辣椒疫霉(Phytophthora capsici)的抗性,以及番茄(Solanum lycopersicum)对丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)的抗性。通过Pull-down和蛋白质谱分析,在烟草中获得了与PeSy1互作的候选靶标蛋白。笔者使用免疫共沉淀、双分子荧光互补和微量热泳动证实了一种受体样胞质激酶RSy1 (Response to PeSy1,RSy1)与PeSy1存在相互作用。PeSy1处理促进了模式触发免疫(P attern-Triggered Immunity,PTI)相关基因的上调表达。同时,烟草VIGS试验显示PeSy1引起的细胞死亡依赖于共受体NbBAK1和NbSOBIR1,这表明PeSy1是Hhs.015的一类微生物相关分子模式(MAMP)。此外,瞬时过表达RSy1的烟草植株在PeSy1处理后表现出对核盘菌更强的抗性。这些研究表明一种受体样胞质激酶参与了PeSy1诱导的植物抗性,而蛋白激发子PeSy1具有研制成新型植物免疫诱抗剂的巨大潜力。
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