【摘 要】
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辣椒是一种重要的蔬菜作物,生产上易受病毒病的影响.为了研究病毒与寄主互作的分子机制,本研究以感染多种病毒(至少包含2种Potyvirus和1种Tomovirus)的辣椒样品为材料,提
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点开放实验室,海南海口571101
【出 处】
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中国热带作物学会遗传育种专业委员会2013年度学术研讨会
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辣椒是一种重要的蔬菜作物,生产上易受病毒病的影响.为了研究病毒与寄主互作的分子机制,本研究以感染多种病毒(至少包含2种Potyvirus和1种Tomovirus)的辣椒样品为材料,提取了包含根、茎、叶、花、果实、种子在内的多个器官组织的辣椒总RNA；利用SMART技术和LD-PCR合成双链cDNA,并用CHROMASPINTE-400柱子去除短片段；以cDNA和线性化载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187获得辣椒酵母双杂交cDNA文库,库容量约为1.34×106CFU.提取酵母文库质粒转化大肠杆菌,利用菌液PCR和酶切进行重组率计算和插入片段验证,结果表明重组率约为90.63％,插入片段主要分布在1000～2500之间.以上结果说明,该文库质量较好,可用于后续的酵母双杂交实验,为研究各种类的病毒与辣椒的互作奠定基础.
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