不同锌离子浓度对腭胚突融合期细胞增殖影响及Sp家族表达分析

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研究目的:观察不同锌离子浓度喂养孕鼠后Sp家族基因(Sp8、Sp5)的表达水平,验证Sp家族基因与腭裂发生的相关性。研究方法:将孕鼠按饲料的锌离子浓度不同随机分为四组:常锌组、缺锌组、低锌组、富锌组。在ED14.5将孕鼠处死,用苏木精一伊红(HE)染色,镜下观察胎鼠腭部发育状况和形态,并选择切片标本进行PCNA染色,观察子代腭胚突融合期细胞增殖情况;剪取ED14.5各组胚胎腭板,利用Real-Time PCR技术检测Sp8及Sp5基因的表达水平。研究结果:ED14.5的胚胎HE染色显示常缺锌组和低锌组胎鼠的双侧腭突生长发育较常锌组和富锌组的发育延迟。PCNA染色显示ED14.5的常锌组和富锌组的胎鼠腭突间充质细胞增殖细胞阳性率明显高于缺锌组和低锌组,差异有统计学意义(P<0.05)。Real-Time PCR结果提示ED14.5,与常锌组相比,缺锌组的腭突组织Sp5mRNA的表达水平明显升高(P<0.05),富锌组的腭突组织Sp5mRNA的表达水平明显下降(P<0.05),缺锌组的腭突组织Sp8mRNA的表达水平稍下降,富锌组的腭突组织Sp8mRNA的表达水平稍升高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。研究结论:(1)母鼠孕期缺锌会抑制胚胎腭突间充质细胞增殖,致使腭突形态变异,上抬动力减弱,最终形成腭裂;(2)缺锌可致子代胚胎融合期Sp5表达升高,富锌对可致子代胚胎融合期Sp5表达下降,推测Sp5在调控腭的发育过程中起负性调节作用。
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