【摘 要】
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目的：探讨脂质介质Protectin DX(PDX)对脓毒症小鼠的治疗作用及其分子机制.方法：雄性C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10),采用盲结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)模拟脓毒症模型.(1)Sham组：小鼠行假手术,术后1h腹腔注射1 00μl生理盐水；(2)CLP组：小鼠行CLP术,术后th腹腔注射100μl生理盐水；(3)CLP+PDX组
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科
【出 处】
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中国医师协会麻醉学医师分会2016年中青年论坛
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目的：探讨脂质介质Protectin DX(PDX)对脓毒症小鼠的治疗作用及其分子机制.方法：雄性C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10),采用盲结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)模拟脓毒症模型.(1)Sham组：小鼠行假手术,术后1h腹腔注射1 00μl生理盐水；(2)CLP组：小鼠行CLP术,术后th腹腔注射100μl生理盐水；(3)CLP+PDX组：小鼠行CLP术,术后th腹腔注射300ng PDX(溶于100μl生理盐水).在术后24小时处死小鼠,取小鼠肺组织以及外周血和腹腔灌洗液(peritoneal lavage fluid,PLF).采用HE染色评估肺组织病理损伤；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中炎症因子(TNF-α,IL-6,MCP-1和IL-10)水平；吉姆萨(Giemsa)染色法观察PLF中中性粒细胞和单核/巨噬细胞数目的变化；流式细胞学检测PLF中巨噬细胞M1和M2分型情况以及巨噬细胞吞噬功能；Western Blot检测PLF中巨噬细胞M2型标志物精氨酸酶-1(Arginase 1,Arg1)和几丁质酶-3样蛋白-3(Chitinase 3-like 3,Arg1)的表达水平.结果：与Sham组相比,CLP组肺损伤病理评分明显增高(P值<0.01)；血浆中的炎症因子(TNF-α,IL-6,MCP-1、IL-10)水平均明显升高(P值均<0.01)；PBL中白细胞总数,中性粒细胞数目和单核巨噬细胞数目显著增加,巨噬细胞吞噬活性增强；PLF中M1型巨噬细胞增多,M2型巨噬细胞减少；巨噬细胞表达Argl、Arg水平降低(P值均<0.05).与CLP组相比,给予PDX处理明显减轻肺损伤病理损伤(P值<0.01),减少PLF中性粒细胞数量,增加单核巨噬细胞与中性粒细胞比例；增强巨噬细胞吞噬活性增强；PDX组小鼠PLF中M1型巨噬细胞减少,M2型巨噬细胞显著增多；并且PLF中巨噬细胞表达Arg1、Arg1水平明显增高(P值均<0.05).结论：PDX通过增加肺泡巨噬细胞数目比例,减少中性粒细胞浸润,调节肺泡巨噬细胞由M1型向M2型极化并增强其吞噬功能,减轻炎症因子水平,进而缓解小鼠脓毒症.
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