【摘 要】
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目的：乏氧是肿瘤细胞辐射抗拒的重要原因,HIF-1是细胞乏氧的信号传导分子中最受关注的转录因子之一.通过对肺腺癌相关噬菌体肽库进行筛选,得到抗HIF-1a多肽,评价多肽对肺
【出 处】
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第九届泛珠江区域放射肿瘤学学术大会暨肿瘤放射治疗多中心协作研讨会、重庆市医学会放射肿瘤治疗学专业委员会2014年会
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目的：乏氧是肿瘤细胞辐射抗拒的重要原因,HIF-1是细胞乏氧的信号传导分子中最受关注的转录因子之一.通过对肺腺癌相关噬菌体肽库进行筛选,得到抗HIF-1a多肽,评价多肽对肺腺癌细胞放疗敏感性的影响.方法：以肺腺癌细胞株A549和HIF-1a为靶抗原,对抗体库进行富集筛选.阳性克隆用IPTG诱导表达并检测.将抗HIF-1a多肽干预的A549细胞进行6MV-X辐照,并设立对照组.干预前后分别进行流式细胞检测细胞凋亡；TUNEL法检测DNA损伤程度；电镜观察细胞组织学形态改变.统计学处理采用SPSS12.0软件,多个样本均数比较行重复测量方差分析.结果：通过亲和筛选,肺腺癌相关多肽得到富集,收获率逐轮提高,第6轮是第1轮的180倍.选取10个克隆经ELISA法检测,其中6个与A549细胞呈阳性反应,阳性率60％ (6/10).SDS-PAGE及ELISA检测证实得到人源抗HIF-1a肺腺癌相关多肽.竞争ELISA显示抗体能有效结合A549细胞.相较于对照组,抗HIF-1a多肽干预组的A549细胞凋亡率高于对照组(P＜0.05)；TUNEL实验观察到实验组更多的DNA损伤(P＜0.05).电镜观察细胞辐照后组织形态改变,实验组观察到更多肿胀细胞及核碎裂.结论：利用肺腺癌细胞A549和HIF-1a为靶抗原,从噬菌体多肽库中筛选获得具有较高特异性的抗HIF-1a肺腺癌多肽.此多肽能提高肺腺癌细胞对放射线辐照的敏感性,增加细胞凋亡坏死.
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