H-ras12V转基因雄鼠肝肿瘤细胞系的建立

来源 :2016第十四届中国北方实验动物科技年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wubo123321
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目的:建立H-ras12V癌基因诱导的小鼠肝肿瘤的细胞系,为携带Ras癌基因的肝肿瘤细胞的生物学特性及相应的治疗方法研究提供生物学材料. 方法:选取9月龄H-ras12V转基因雄鼠一只,采取肝肿瘤组织,通过组织培养的方法获取肝肿瘤细胞系.并通过PCR、RT-PCR、Western Blot及增殖曲线检测等实验鉴定该新建立肝癌细胞系的基因型和基本生物学特性. 结果:通过肝肿瘤组织原代培养的方法获取原代肝肿瘤细胞后,经反复传代最终获得了来自H-ras12V转基因雄鼠的稳定的肝肿瘤细胞系.该细胞系的细胞形态较为一致,增殖状态良好.分子生物学检测结果表明,该细胞系携带H-ras12V转基因,并呈现高表达.而且Ras癌基因的表达有效激活了MEK/ERK和AKT/mTOR信号通路.这些生物学特性与H-ras12V转基因小鼠的肝肿瘤特性相同. 结论:本实验室成功建立了H-ras12V转基因肝癌雄鼠的肝肿瘤细胞系.该细胞系为Ras癌基因诱导肝肿瘤发生发展的机制研究及靶向Ras/MAPK信号通路的分子药物的开发提供了良好的研究对象.
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