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基于传统检测技术无法对犬猫钩虫和贾第虫进行准确检测,本试验建立了锡兰钩虫、犬钩虫和蓝氏贾第虫(A型)的多重PCR检测方法.根据GenBank上锡兰钩虫和犬钩虫的核糖体ITS序列及蓝氏贾第虫(A型)的TPI基因序列,按照多重PCR引物设计原则,设计3对特异性引物.通过对反应条件的优化,建立多重PCR方法,并进行敏感性、特异性和临床应用试验.结果显示,该多重PCR方法可同时扩增出3条与试验设计相符的特异性条带;对锡兰钩虫和犬钩虫的最低检出限均为10个虫卵,对蓝氏贾第虫(A型)DNA的最低检出限为72 pg;112份粪样中锡兰钩虫、犬钩虫和蓝氏贾第虫(A型)的检出率分别为17.8%、34.8%和2.7%.结果表明,该方法特异敏感,可为锡兰钩虫、犬钩虫和蓝氏贾第虫(A型)的分子检测和流行病学调查提供新的技术手段.