鳜鱼TCRα基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

来源 :广东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangkun289
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为建立Real-time PCR方法检测鳜鱼T细胞受体α链(TCRα)转录水平,根据GeneBank上鳜鱼TCRα基因序列设计并合成特异性引物,以鳜鱼β-actin基因作为内参,采用RT-PCR方法从鳜鱼的胸腺总RNA中扩增得到鳜鱼TCRα和β-actin基因,将目的片段纯化后克隆到PMD18-T载体上,测序鉴定。以阳性质粒为标准品,采用SYBR GreenⅡ染料法进行实时荧光定量PCR扩增,构建标准曲线并进行溶解曲线分析。结果表明鳜鱼TCRα基因的Ct值与标准品稀释度在1×10~2~1×10~8拷贝/μL范围呈良好的线性关系,r~2达0.99以上,溶解曲线分析表明产物为特异的单峰。建立鳜鱼TCRα实时荧光定量PCR检测方法,为在mRNA水平对鳜鱼TCRα的定量分析奠定了基础。
其他文献
高中数学中解析几何最大的问题是运算问题,很多学生会做能写,但就是算不出来.一味抱怨学生的计算能力差并不能解决任何问题,对简化运算的研究也成为很多教师解题研究的方向.
为加快推进广东现代农业建设,选取广东24个农业主导产业作为研究对象,重点研究了24个农业主导产业的发展现状、供求变化、市场情况及发展对策,以期为社会各界提供最新、最全
本文在综合分析独立学院专业特色建设必要性、目前专业设置现状的基础上,提出了独立学院专业特色建设策略和原则,从而为独立学院的持续、健康发展提供一定的理论依据。
<正>1研究目的胜任力是指能将某一工作(或组织、文化)中表现优异者与表现平平者区分开来的个人潜在的、深层次的特征,它可以是动机、特质、自我形象、态度或价值观、某领域的
会议
近些年,各机构和高校对科技研发的重视程度上升,电子元器件的使用消耗也随之提高,元器件的使用种类也更加多样和复杂,再依靠传统的人工形式进行管理,效率和质量上都有欠缺。
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
采用真空多弧镀设备在TC11钛合金表面沉积超硬耐磨ZrN防护涂层,通过增压气流固体颗粒冲蚀实验评价ZrN涂层的耐磨抗冲蚀性能,划痕仪测试涂层与基体的结合力,SEM、X射线分析涂