4种固定液对小鼠视网膜固定效果的比较

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:djldh138
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  [目的]95%乙醇、10%甲醛、Bouin's液和Davidson's液四种固定液中进行优选,用于对小鼠眼球视网膜的固定.[材料和方法]NIH小鼠采用颈椎脱臼法处死后,取出小鼠双侧眼球,共眼球40只.随机分为4组,每组10只,分别固定于4种固定液中.95%乙醇固定液:100%乙醇95ml,蒸馏水5ml,混匀后浸泡固定24小时.10%福尔马林固定液:甲醛原液(37%~40%)10 ml,蒸馏水90 ml,混匀后浸泡固定24小时.Bouin's固定液:饱和苦味酸水溶液75ml,甲醛原液25ml,冰醋酸5ml,混匀后浸泡固定24小时.Davidson's固定液:95%乙醇30 ml、甲醛原液(37%~40 %)20ml、冰醋酸10ml、蒸馏水20ml,混匀后浸泡固定6h,移至甲醛溶液中继续固定24小时.固定后标本经80%、95%、95%、100%、100%、100%酒精脱水之后,用TO型生物制片透明剂透明三次,浸蜡三次,最后石蜡包埋.HE染色,观察染色效果及视网膜节细胞层、双极细胞层、视细胞层及色素上皮层.[结果]95%乙醇固定的小鼠眼球,HE染色观察,细胞核偏蓝,视网膜变薄、脱落、破碎明显,视网膜细胞特别是视细胞层及双极细胞层皱缩明显、结构不清.10%福尔马林固定的小鼠眼球,着色较鲜艳、红蓝对较鲜明,视网膜轻度变薄,各层排列较平整,未见明显缺失,可见到较明显的视网膜脱落,节细胞层、双极细胞层、视细胞层细胞轻度皱缩、细胞间见明显的空白裂隙.Bouin' s液固定的小鼠眼球,着色不够鲜艳、红蓝对比不够鲜明,未见明显的视网膜变薄,视网膜各层排列较平整,未见明显缺失,可见明显的视网膜脱落,各层视网膜细胞特别是节细胞排列整齐、结构清晰.Davidson' s液固定的小鼠眼球,着色鲜艳、红蓝对鲜明,视网膜轻微变薄,视网膜各层排列较平整,未见明显缺失,罕见小范围轻微的视网膜脱落,各层视网膜细胞结构较清晰、完整.[结论]在小鼠视网膜的固定中,Davidson' s及Bouin's固定液较理想,可根据具体的实验要求进行选择.
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