【摘 要】
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本研究克隆了狮头鹅Myostatin编码区cDNA,核苷酸序列经分析与其它畜禽Myostatin高度同源.再将狮头鹅Myostatin成熟肽cDNA序列插入到表达质粒pRSET A的BamHⅠ和SacⅠ克隆位点之间,构建重组质粒pMstn SCAU(单体).然后利用质粒上存在的BamHⅠ和位于SacⅠ下游的BglⅡ两同尾酶,构建成重组质粒pMstn2 SCAU(二聚体).将两重质粒转化入大肠杆菌E
【机 构】
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华南农业大学动物科学学院(广州) University of Hawaii at Manoa,Ho
【出 处】
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中国畜牧兽医学会第十二次全国动物遗传育种学术讨论会
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本研究克隆了狮头鹅Myostatin编码区cDNA,核苷酸序列经分析与其它畜禽Myostatin高度同源.再将狮头鹅Myostatin成熟肽cDNA序列插入到表达质粒pRSET A的BamHⅠ和SacⅠ克隆位点之间,构建重组质粒pMstn SCAU(单体).然后利用质粒上存在的BamHⅠ和位于SacⅠ下游的BglⅡ两同尾酶,构建成重组质粒pMstn2 SCAU(二聚体).将两重质粒转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)株进行Myostatin融合蛋白的表达,用IPTG诱导后分别表达出分子量约为18kDa的单体和31kDa的二聚体Myostatin融合蛋白,在最佳条件下表达量分别占全菌总蛋白质的20.48％和5.52﹪.两融合蛋白分别可以用Ni-NTA凝胶进行层析纯化,说明分子中含有6 X His标记.用兔抗鸡Myostain抗体进行的免疫印迹分析结果证明所表达的两种蛋白为Myostatin融合蛋白.以上结果表明本研究成功克隆了狮头鹅肌肉生长抑制素编码区cDNA并依此成功构建、表达和纯化了Myostain成熟肽单体和二聚体的融合蛋白,以用作免疫促进动物的肌肉生长的基因工程疫苗.
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利用7个微卫星标记对12个地方鸡品种的等位基因频率、平均基因杂合度、平均多态信息含量以及群体间的亲缘关系进行分析.结果表明:鹿苑鸡平均基因杂合度最高,为0.5929,遗传多样性最丰富;茶花鸡平均遗传杂合度最低,为0.3514.各地方鸡品种模糊聚类结果显示:乌骨鸡与斗鸡先聚在一起,然后依次与狼山鸡、大骨鸡、萧山鸡、油鸡、鹿苑鸡5个兼用型地方鸡品种聚为一类;茶花鸡与藏鸡先聚在一起,然后与仙居鸡、白耳鸡
利用RAPD技术对9个家猪群体的遗传多样性进行了研究,包括13/17罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的三个群体、丹系长白猪群体;加系双肌臂杜洛克猪群体,加系双肌臂大约克猪群体,加系双肌臂长白猪群体,及欧洲猪与易位杂合子猪产生的两个杂交后备猪群体.在事先优化的反应条件下用17条已筛选出的产生多态性的随机引物对模板DNA进行扩增.共得到384条清晰稳定的多态性片段,片段长度在200~400
运用条件分析方法,并结合QTL区间定位,研究了CAU资源群体两个混合家系中鸡的生长性状QTL效应的表现.将条件定位与非条件定位所得结果进行比较发现,QTL发生了效应降低、增高、掩盖和位置转移等变化,使我们对复杂数量性状在不同时期发生时空动态变化的发育遗传学本质能够有所了解.
分子遗传标记AFLP是建立在PCR和RFLP技术上的一项新的DNA指纹技术,可广泛应用于种系鉴定、遗传多样性检测、群体分类研究、构建遗传图谱、标定目的基因等方面.其最适应用范围是利用AFLP技术鉴定品种的质量和纯度,进行基因型的指纹鉴定.本文利用遗传标记AFLP,选用已发表的牛的AFLP标记引物,通过PCR方法获得多态性丰富、重复性好的西门塔尔牛、延边牛、南阳牛等三个牛品种的AFLP的DNA指纹图
对56只西农萨能奶山羊β-1g基因5/侧翼区进行了PCR-RFLP分析,发现等位基因A的频率为0.91,B的频率为0.09,基因型为AA的个体其各胎次产奶量均比AB型高,其中在第二、三胎次和前四胎总产奶量3项指标上都达显著水平(P0.05).
对通城猪的保种、选育与利用和所取得的成效进行了阐述,分析了通城猪种质资源保存、利用中所存在的问题和不利因素,并提出可能有助于摆脱困境的一些对策与看法.
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