【摘 要】
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目的：探讨亚砷酸钠对血管生成的效应,阐明砷经microRNA调控CCM3表达对血管生成的影响.方法：采用HUVECs,亚砷酸钠终浓度为0、1.0、5.0、10μM.MTS、细胞迁移及小管形成实验观察血管生成效应;qRT-PCR检测miRNA及基因表达,western bloting检测蛋白表达;构建CCM33UTR区野生型和突变型的载体,采用双荧光素酶报告基因检测系统,进行microRNA调控靶基
【机 构】
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中山大学公共卫生学院 广东省广州市581000;赣南医学院预防医学系 江西省赣州市341000 中
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
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目的：探讨亚砷酸钠对血管生成的效应,阐明砷经microRNA调控CCM3表达对血管生成的影响.
方法：采用HUVECs,亚砷酸钠终浓度为0、1.0、5.0、10μM.MTS、细胞迁移及小管形成实验观察血管生成效应;qRT-PCR检测miRNA及基因表达,western bloting检测蛋白表达;构建CCM33UTR区野生型和突变型的载体,采用双荧光素酶报告基因检测系统,进行microRNA调控靶基因的验证.
结果：随着砷染毒剂量的增加,HUVECs细胞活力呈先增加后降低的趋势,在20、40μM时显著下降,划痕实验显示在5和10μM时细胞迁移显著下降,而小管形成实验显示在5和10μM呈现出小管形成数目明显降低.体内体外实验均表明:随着砷剂量的增加,miR-425-5p逐渐降低,CCM3逐渐增加,且miR-425-5p的靶基因为CCM3.miR-425-5p对砷导致的血管生成抑制的逆转作用,其中Notch、VEGF和p38信号通路可能发挥一定作用.
结论：亚砷酸钠可经由miR-425-5p调控CCM3表达对其血管生成的发挥作用,涉及的信号通路有Notch/VEGF/p38.
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