量子点与FITC对人舌鳞癌细胞中Survivin和HSP70蛋白进行双重标记及光稳定性的实验研究

来源 :广东省口腔医学会第三次会员代表大会暨第十次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Aweichunxing890620
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  目的:利用量子点(QD655m)和异硫氰酸荧光素(FITC)对人舌癌Tca8113细胞内Survivin和HSP70蛋白进行特异性荧光双重标记,并对QD655nm与FITC的光稳定性进行比较,为后期的动态连续长时间观察提供理论依据。方法:利用QD655nm和FITC,通过间接免疫荧光法,对人舌癌Tca8113细胞内Survivin蛋白和HSP70蛋白进行特异性荧光双重标记,在激光共聚焦显微镜下同时观测人舌癌Tca8113细胞内的Survivin和HSP70表达及细胞内分布情况。激光连续照射2 420 391 ms,用激光共聚焦显微镜自带软件Leica Confocal Software测量量子点QD655nm和FITC的荧光信号强度变化。结果:激光共聚焦显微镜下可见人舌癌Tca8113细胞内survivin蛋白和HSP70蛋白均有明显表达,分别表现为红色和绿色荧光,其中两种蛋白重叠处呈黄色荧光。激光连续照射2420391 ms,QD655nm标记的红色荧光未见明显衰减,而FITC标记的绿色荧光基本淬灭,随着FITC的淬灭,多色通道下所见的3种颜色的荧光也逐渐消退直至变成单色的红色荧光。结论:量子点荧光标记技术能对细胞内survivin蛋白进行标记,可以利用量子点与FITC同时对人舌鳞癌细胞中Survivin和HSP70蛋白进行双重标记,QD655m比传统的有机荧光FITC在光强度和稳定性上具有更显著的优点。
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