宁夏枸杞内生真菌的分离及其多样性研究

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为了深入了解内生真菌在其宿主枸杞体内的生态功能和作用机制,更好地利用枸杞内生真菌资源和挖掘其潜在的重要经济价值,本研究在宁夏枸杞研究所品种园和银川森淼枸杞园选择了5个栽培枸杞品种和2个野生枸杞品种作为研究对象,分析了它们的内生真菌种类组成及其分布特点,以期为枸杞内生真菌的合理开发和利用提供理论依据。从宁夏枸杞研究所品种园采集nq-1、黄果枸杞(Lycianthes barbatum L.var.auranticarpum K.F.Ching)、黑果枸杞(Lyciumruthe nicum Murr)一个栽培品种两个野生品种和银川市森淼枸杞园采集Ningqi-2、Ningqi-5、Ningqi-7、Ningqi-8四种栽培枸杞品种共7个品种(所有品种均由宁夏回族自治区林木品种审定委员会审定)的健康枸杞枝条。每个品种的样品采集按照随机取样法进行采集,在枸杞园中随机选取除去边行之外的5行,每行随机选取5株,随机采集每株上、中和下不同部位枝条,共计21份。7个宁夏枸杞品种21份样品按茎、叶、果3个部位采用组织分离法进行内生真菌的分离。根据培养性状、菌落、孢子等的形态特征和rDNA-ITS序列分析对分离菌株进行鉴定。21份枸杞样品中共分离得到363株内生真菌,这些菌株分属于链格孢属(Alternaria)、曲霉属(Aspergillus)、双极霉属(Bipolaris)、毛壳菌属(Chaetomium)、枝孢属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)、青霉菌属(Penicillium)、光黑壳属(Preussia)、裂壳菌属(Schizothecium)、粪壳菌属(Sordariomycetes)、戴氏霉属(Taifanglania)、梭孢壳属(Thielavia)、火丝菌属(Tricharina)和炭角菌属(Xylaria)14个属,其中链格孢属(Alternaria)、梭孢壳属(Thielavia)和曲霉属(Aspeirgllus)为优势属,分别占分离菌数的43%、16%和13%。枸杞植株各器官都有内生真菌分布,其中叶部相对频率最高,为39.94%,茎部内生真菌多样性指数最大,为0.88,且叶与茎部的相似性系数最大。不同枸杞品种间内生真菌分布存在差异,宁杞1号和宁杞2号内生真菌多样性指数和丰富度指数远远高于黄果枸杞和黑果枸杞。宁夏枸杞中蕴藏着丰富的内生真菌,内生真菌在宁夏枸杞中的分布受组织部位和品种的影响,某些内生真菌具有一定的宿主和组织偏好性。栽培品种中分离得到的内生真菌种类普遍比野生品种多。枸杞品种和含有的营养物质及生理环境不同,而不同的真菌对营养物质和生理环境要求不同,从而影响内生真菌的分布。
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