【摘 要】
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目的：构建胚胎植入期不同时点暴露于二硫化碳(CS2)致胚胎植入障碍动物模型,检测不同染毒时间点与不同观察终点的孕鼠子宫内膜细胞DNA损伤及子宫组织甲基转移酶1(DNMT1)表达水
【机 构】
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山东大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学研究所
【出 处】
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第十三届全国劳动卫生与职业病学术会议
论文部分内容阅读
目的：构建胚胎植入期不同时点暴露于二硫化碳(CS2)致胚胎植入障碍动物模型,检测不同染毒时间点与不同观察终点的孕鼠子宫内膜细胞DNA损伤及子宫组织甲基转移酶1(DNMT1)表达水平,探讨CS2致胚胎植入障碍机制.
方法：健康雌性昆明小鼠分别在孕3天(GD3)、GD4、GD5、GD6单次暴露CS2(剂量为631.4mg/kg,染毒前配置;对照组为橄榄油),在相应终点结束实验.GD9观察CS2对孕鼠胚胎植入的影响.运用单细胞凝胶电泳法检测CS2对孕鼠子宫内膜细胞DNA损伤作用,考马斯亮蓝法对暴露组和对照组孕鼠子宫组织匀浆液进行蛋白定量,十二烷磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和蛋白免疫印迹法测定孕鼠子宫组织甲基转移酶1(DNMT1)含量.
结果：各暴露组胚胎植入数目均明显低于对照组(P＜0.01).孕鼠子宫内膜细胞DNA损伤各项指标(TL、TM、OTM和TDNA％)在CS2暴露后6h时明显升高(P＜0.01),并在暴露后18h时达到最高点(P＜0.01),之后各指标值逐渐下降.相关分析结果显示,CS2暴露后18h时孕鼠子宫内膜细胞DNA损伤指标TM、OTM、TL和TDNA％与胚胎植入数目之间呈负相关(r=-0.804、-0.847、-0.934和-0.863,P＜0.01).孕鼠在GD4暴露于CS2,暴露后6h时孕鼠子宫组织DNMT1表达水平明显降低,而在暴露后12h时孕鼠子宫组织DNMT1表达水平明显升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).相关分析结果显示,CS2暴露后12h孕鼠子宫组织DNMT1表达水平与胚胎植入数目之间呈负相关(r=-0.433,P＜0.01).
结论：围植入期暴露于CS2导致的子宫内膜细胞DNA损伤和子宫组织DNMT1水平表达水平的变化,子宫组织DNMT1水平的增高可能与DNA氧化损伤后碱基切除修复有关.DNA损伤毒性作用与DNMT1高表达破坏母体子宫内膜对胚胎的容受性可能是CS2暴露致胚胎植入障碍的机制之一.
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