【摘 要】
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目的:本研究通过建立小胶质细胞锰暴露模型,探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)在锰诱导小胶质细胞炎性反应中的作用。材料和方法:以小鼠BV2小胶质细胞为研究对象,建立锰
【机 构】
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第四军医大学军事预防医学系劳动与环境卫生学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(81230063)
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目的:本研究通过建立小胶质细胞锰暴露模型,探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)在锰诱导小胶质细胞炎性反应中的作用。材料和方法:以小鼠BV2小胶质细胞为研究对象,建立锰暴露小胶质细胞模型,锰暴露浓度分别为0、50μM、100μM。采用免疫荧光化学染色方法检测锰暴露对小胶质细胞形态的影响;采用实时荧光定量qRT-PCR法检测趋化因子mcp1、cxcl1,炎性因子tnf-α,免疫信号通路分子traf3 mRNA表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液中分泌的TNF-α蛋白水平;采用免疫蛋白印迹(Western Blot)法检测TNF-αt、TRAF3蛋白表达;采用细胞转染方法,检测高表达TRAF3对锰诱导小胶质细胞炎性反应的影响。结果:锰暴露24h后BV2细胞胞体变大变园,突起变短或消失,由静息态转变为活化状态;与对照组相比,活化细胞比例增高(P<0.05)。锰暴露后,趋化因子mcp1、cxcl-1,炎性因子tnf-αmRNA表达水平增加(P<0.05),呈剂量依赖关系;细胞培养液中分泌的TNF-α水平增加,呈剂量依赖关系;免疫信号通路分子traf3mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),呈剂量依赖关系。转染TRAF3高表达质粒后,可抑制锰暴露诱导的小胶质细胞mcp-1、cxcl-1、tnf-αmRNA表达增加(P<0.05),并抑制锰暴露诱导小胶质细胞释放炎性因子TNF-α(P<0.05)。结论:锰暴露可诱导小胶质细胞炎性反应,并通过免疫信号通路分子TRAF3调节小胶质细胞趋化因子的表达,以及炎性因子的表达和分泌。
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