在食品工业生产中，混合物种形成的生物被膜是细菌的主要存在形式。通常对生物被膜的研究往往聚焦于单一物种而忽略了混合物种之间形成的生物被膜，本研究建立了一个副溶血性弧菌和腐败希瓦氏菌混合物种生物被膜的体外模型。通过结晶紫染色、MTT 法及平板菌落计数观测单一和混合物种生物被膜的动态形成过程；进一步从微观层面上利用激光共聚焦显微镜和扫描电镜观测单一和混合物种生物被膜的空间结构与分布，生物量与孔隙率的差异情况；紧接着提取单一和混合物种生物被膜的胞外聚合物比较其成分差异并进一步用拉曼光谱验证分析；最后用光动力灭活这种新型的非热杀菌技术来表征单一和混合物种生物被膜对外抗性的差异。结果表明，副溶血性弧菌与腐败希瓦氏菌混合物种生物被膜之间存在协同作用并且对外抗性比单一物种生物被膜更强。总之，本研究首次揭示了副溶血性弧菌与腐败希瓦氏菌单一和混合物种生物被膜之间相互作用及对外耐受性，为今后应对混合物种生物被膜的感染和清除提供了理论依据。