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目的:应用PCR芯片技术筛选甘草诱导的人正常肝细胞L-02参与Ⅰ相代谢反应酶系的差异表达基因,并对其进行生物学分析,为进一步阐明甘草作用的分子机制提供实验依据。
方法:以200μg/mL的甘草水提物诱导人正常肝细胞L-02,第三天收获肝细胞,用Trizol试剂提取RNA,应用美国Super Array公司Real-time PCR基因芯片检测甘草组和空白组基因的差异表达。
结果:甘草组与空白组比较,全部84个基因中有10条差异表达明显的基因,其中上调和下调的基因各有5条。所有差异表达基因均只涉及药物Ⅰ相代谢反应中的氧化反应。
讨论:应用Real-timePCR芯片技术筛选了甘草水提物诱导L-02细胞中参与Ⅰ相代谢反应的差异表达基因,反映出甘草主要参与调节其中的氧化反应,且对于肝微粒体混合功能氧化酶系催化的氧化反应呈负性调控状态,占60%;而对非肝微粒体混合功能氧化酶系催化的氧化反应占60%,呈正性调控状态。