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目的:研究肝细胞特异性敲除Dicer小鼠肝脏中细胞色素P450 酶(CYP)的表达变化,发现可能被microRNA 调控的CYP, 进而研究microRNA 对于CYP 相关生理或病理过程的影响。
方法:Alb promoter-driven Cre recombinase 转基因小鼠与含Floxed allele of Dicer的小鼠杂交得到肝细胞特异性敲除Dicer的小鼠。取3,4,5,6 周龄小鼠肝脏,匀浆后提取蛋白质或抽提总RNA 进行相关实验。人肝癌细胞系PLC/PRF/5 中用基因沉默的方法敲减DICER 后, 检测CYP 的表达变化。
结果:Cyp2e1 在所检测各年龄段肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达均下调,而Cyp1a2 和Cyp3a11 仅在5-6 周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达下调,Cyp2b10 在5-6 周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达上调。人肝癌细胞 PLC/PRF/5 中DICER 基因沉默后CYP2E1 表达下调。
结论:DICER 表达下调后几种CYP 表达均有不同程度变化,体内外结果均显示CYP2E1 表达被下调,因DICER 是microRNA 成熟过程中重要的核酸内切酶,故而CYP2E1 基因表达可能受到microRNA 调控。CYP2E1 是肝脏内重要的代谢酶,乙醇对CYP2E1 的诱导是酒精致肝毒性的重要环节,CYP2E1 的表达量和肿瘤易感性、糖尿病等也密切相关。microRNA 可能成为CYP2E1 的重要调节因素,从而参与到CYP2E1 相关的生理或病理过程。
方法:Alb promoter-driven Cre recombinase 转基因小鼠与含Floxed allele of Dicer的小鼠杂交得到肝细胞特异性敲除Dicer的小鼠。取3,4,5,6 周龄小鼠肝脏,匀浆后提取蛋白质或抽提总RNA 进行相关实验。人肝癌细胞系PLC/PRF/5 中用基因沉默的方法敲减DICER 后, 检测CYP 的表达变化。
结果:Cyp2e1 在所检测各年龄段肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达均下调,而Cyp1a2 和Cyp3a11 仅在5-6 周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达下调,Cyp2b10 在5-6 周龄肝细胞特异性敲除Dicer 小鼠肝脏中表达上调。人肝癌细胞 PLC/PRF/5 中DICER 基因沉默后CYP2E1 表达下调。
结论:DICER 表达下调后几种CYP 表达均有不同程度变化,体内外结果均显示CYP2E1 表达被下调,因DICER 是microRNA 成熟过程中重要的核酸内切酶,故而CYP2E1 基因表达可能受到microRNA 调控。CYP2E1 是肝脏内重要的代谢酶,乙醇对CYP2E1 的诱导是酒精致肝毒性的重要环节,CYP2E1 的表达量和肿瘤易感性、糖尿病等也密切相关。microRNA 可能成为CYP2E1 的重要调节因素,从而参与到CYP2E1 相关的生理或病理过程。