鹅源副粘病毒NA-1株F蛋白基因的扩增、克隆及序列分析

来源 :吉林省畜牧兽医学会2005年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:c_zhang08
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鹅源副粘病毒NA-1株经11日龄SPF鸡胚增殖后收集尿囊液,浓缩,提取病毒基因组总RNA,采用RT-PCR方法,一次性扩增出与预期设计大小相符的特异性条带.将扩增产物经凝胶提纯回收后克隆入pMD18-T载体,经转化,筛选及酶切鉴定后,初步获得了含鹅源副粘病毒NA-1株F基因的阳性克隆,并进行了序列测定.序列分析表明:扩增的F基因片段的长度为1672 bp,包含完整的开放阅读框1662 bp,共编码553个氨基酸,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112R-R-Q-K-R-F117,与NDV的强毒株特征相符,同时也与鹅源副粘病毒NA-1分离株致病性试验结果相符,同源性分析表明:与国内外发表的部分NDV毒株的部分核苷酸序列同源性在81.2%-89.6%之间,说明鹅源副粘病毒NA-1株相对于经典的NDV在F基因上已发生了较大的变异.
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