【摘 要】
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研究背景:免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是常见的自身免疫性出血性疾病。病因主要是患者体内抗血小板自身抗体或细胞毒性T细胞介导的血小板破坏增多。CD4
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研究背景:免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是常见的自身免疫性出血性疾病。病因主要是患者体内抗血小板自身抗体或细胞毒性T细胞介导的血小板破坏增多。CD41/CD61复合物是血小板表面主要的特异性糖蛋白,现已有使用CD61敲除(KO)小鼠构建的ITP模型,但CD61除表达于血小板和巨核细胞外,还可表达于内皮细胞,因此敲除CD61常导致胎盘缺陷和产后出血,增加了构建ITP小鼠模型的难度;而CD41只表达于血小板及巨核细胞,所以CD41 KO小鼠的繁殖过程中未见上述问题。研究目的:使用CD41 KO小鼠建立新型的ITP模型,为进行ITP体内研究提供新的模型工具。方法:1、CD41 KO小鼠每周注射10~8个野生型鼠血小板,连续4周。流式细胞术检测CD41KO小鼠的血清抗体滴度并留取达标小鼠的脾脏,研磨得到脾细胞备用。2、对严重联合免疫缺陷小鼠(SCID)小鼠进行200cGy全身辐照,并将SCID小鼠分成AB两组,A组仅接受辐照,B组接受辐照后3小时内腹腔注射5×10~4个上述脾细胞。3、每周血细胞计数仪检测外周血中血小板计数及流式测定血清抗CD41抗体水平。对死亡小鼠进行解剖观察。结果:1、CD41 KO小鼠在连续免疫4周后,血清中抗CD41抗体较未免疫鼠明显升高。2、A组小鼠在1周时血小板计数下降,2周时恢复,无死亡;B组小鼠血小板计数显著下降且未恢复,部分小鼠死亡,死亡小鼠解剖,可见多个脏器或组织内出血。3、A组小鼠外周血清未检测到抗血小板抗体,而B组小鼠血清抗体水平较A组显著升高。结论:本研究以CD41 KO鼠为供体鼠,SCID鼠为受体鼠,成功构建了一种新型主动型ITP小鼠模型,该模型可稳定维持4周时间,且CD41 KO小鼠在饲养过程中表型及行为未见明显异常,且可育、多产,有效规避了受体鼠繁殖困难等自身缺陷,为进行ITP体内研究提供了新的模型工具。
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