基于微纳流控酶反应器的蛋白质分析研究

来源 :中国化学会第29届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdf200201
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  低丰度蛋白质的分析鉴定是蛋白质分析的关键瓶颈问题之一,为了实现低量蛋白质的酶解鉴定,我们建立了各种微纳流控酶反应器技术。介孔材料由于其独特的结构特点,在蛋白质组学分析及酶反应研究中有着潜在的优势,我们发展了一系列基于大孔氧化硅材料的纳反应器,通过直接将有序大孔氧化硅加入到常规酶解体系中,即可极大的提高酶反应效率;同时,通过调节氧化硅的表面电荷,实现了对不同等电点蛋白的选择性酶解;通过在表面引入氧化铝基团,得到了一种磷酸化蛋白质/肽段分析的复合纳反应器,极大的简化了传统的富集分离过程;采用以硼酸物种修饰大孔氧化硅,我们得到了具有糖基靶向性的纳反应器。此外,我们还建立了各种基于微流控液滴技术的酶反应器,用于复杂蛋白质的在线分离、酶解和质谱分析,通过将液滴微流控芯片作为色谱和质谱的接口,蛋白质混合物经分离后,在微流控芯片液滴中酶解,每个液滴可作为独立的微反应器,该反应体系避免了样品间的交叉污染和记忆效应。发展了基于微流控液滴技术的痕量组分在线富集方法,可实现低浓度/低丰度样品的在线浓缩,并且可以与质谱、光谱、电化学等检测器进行联用,液滴微流控芯片在高度集成的蛋白酶解领域有着很好的应用潜力。
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