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将TGEV、PEDV、PRV接种PK15细胞观察细胞病变,将细胞反复冻融三次收获病毒,并对病毒增值纯化。根据GenBank中已发表各病毒基因序列设计特异性引物,以病毒RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出TGEV-S、PEDV-M、PRV-VP6基因,相应的片段分别长410bp、501bp、432bp。将扩增的目的基因连接到pMD18-T载体上,经蓝白斑筛选出阳性克隆进行序列测定。用DNAStar工具将其与GenBank上标准代表毒株序列进行了比较。结果显示:通过RT-PCR扩增出TGEV-S、PEDV-M、PRV-VP6基因,所选基因特异性很强,通过序列分析,同源性分别高达96.1%、97.4%、85%,具有高度保守性,表明可以作为芯片探针应用到基因芯片的制备。