柑橘类黄酮对Neuromedin U2受体的激活效应研究

来源 :第五届生物产业技术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyan68
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  目的:利用共转染人的基因(NMU2R/pCDNA3.1+)质粒和报告基因质粒(3×MRE/3×CRE/SRE-Luciferase/pGL3)所得到的NMU2R稳定细胞株,筛选柑橘类黄酮中的NMU2R特异外源激动剂。方法:首先用含3%FBS的H-DMEM培养基收集细胞培养瓶中的NMU2R细胞,接种细胞密度约为2×104个/孔的细胞于96孔板,孵育过夜;然后在每孔中加入待测药物溶液和Forskolin溶液,培养6-8 h后加入等体积0.5×Bright-GloTM溶液,用荧光检测仪测定荧光素酶的信号值,以此确定待测药品对NMU2R的激活效果;最后通过NMU2R的siRNA干扰效率分析捧除假阳性的干扰。结果:(1)柚皮苷、橘皮素不能有效激活NMU2R;(2)橙皮苷、川陈皮素能激活NMU2R,其EC50值分别为194.8ug/ml和2.4 ug/ml.结论:柑橘类黄酮中的橙皮苷、川陈皮素可能是NMU2R的外源激动剂。
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